检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用.pdf

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1、·162·疾病防治中国畜牧兽医2010年第37卷第2期检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用廖文军，吴健敏，覃绍敏，袁书智。，陈凤莲，华俊，谢彬(1．广西兽医研究所，南宁530001；2．南宁惠朋动物药业有限责任公司，南宁530001)摘要：以纯化的抗人红细胞单链抗体(SeFv)一猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原，建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55／xg／mI，血清最佳稀释度为1：2O，作用时间15min

2、，与猪瘟(CSF)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪布氏杆菌病(Brucellosis)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不出现红细胞凝集现象，与PRV标准阳性血清反应出现肉眼可见的凝集圈。与美国进口的PRV抗体检测gE—EIISA诊断试剂盒检测结果比较，5O份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100。红细胞凝集试验检测方法具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点，可用于PRV野毒感染的快速筛查。关键词：猪伪狂犬病病毒；红细胞凝集试验；gE基因；

3、抗体检测中图分类号：$852．4文献标识码：A文章编号：1671—7236(201O)020162—04猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒(pseudorabies传染病(Salwa等，2004)。PRV主要引起仔猪的高virus，PRV)引起的猪和多种动物共患的一种急性死亡率和妊娠母猪的繁殖障碍，流行广泛，一旦传人猪群，将导致巨大的经济损失，且很难根除(Ao等，收稿日期：200910—272003)。目前诊断PRV常用的血清学方法有血清作者简介：廖文军(1983～)，男，湖北人，硕士，研究方向：分子

4、免中和试验(SNT)、乳胶凝集试验(LAT)、琼脂免疫疫学与传染病学。扩散试验(AGID)、血凝试验(HA)与血凝抑制试验通信作者：吴健敏。Tel／Fax：0771～3120373；Email：wwjm20@163．corn(HI)、酶联免疫吸附试验(EUSA)等(何启盖等，基金项目：广西科技攻关项目(桂科攻0537008—3A3；桂科攻1999)，其中SNT、LAT和ELlSA3种方法是美国06320021-2)⋯～⋯～⋯～一'⋯⋯⋯⋯⋯⋯】⋯】⋯⋯⋯l一(1．ZhengzhouCollege

5、ofAnimalHusbandryEngineering，Zhengzhou450011，China；2．HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou450002，China：3．HenanCentreforAnimalDiseaseControlandPrevention，Zhengzhou450008，China)Abstract：InordertoscientificallyevaluatethedrugsensitivityofpathogenicEsche

6、richiacolistrainsisolatedfrompiglit’syellowdysenteryandthecureeffectsofdifferentdrugadministratingways，thepathogenicEscherichiacoli(E．coli)strainswerefirstisolatedfrompigletssickenedyellowdysenteryin25large—scalepigfarmsfromHenanprovince．Thevirulence

7、testswerecarriedoutbyanalyzingpathogenicityoftheisolatedE．colistrainstomouse．Drugsensitivetestsoftheisolatedbacteriastrainson20kindsofantibioticswerecarriedouttoestimatethemostsensitiveantibioticsdrugs．Threedifferentwaysofdrugadministratingwhichinclu

8、dingoraladministration，intramuscularinjectionandintraperitonealjnjectionweretestedtoevaluatethebestdrugadministrationway．Theresultsdemonstratedthattotal25strainsofE．coliwereisolatedfrom25sickenedpigfarms．AlltheisolatedE．colistrainsdisplayedthepathoge