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《胶体金免疫层析法检测丙型肝炎病毒抗体的临床应用评估.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、728陕西医学杂志2008年6月第37卷第6期·临床检验·胶体金免疫层析法检测丙型肝炎病毒抗体的临床应用评估河南科技大学第一附属医院中心实验室(洛阳471003)孙宗立谷雷李武威任利群白腊梅摘要目的:对胶体金免疫层析法(GICA)检测丙型肝炎病毒抗体(抗2HCV)的特异性、灵敏度、重复性、试条渗透性、固相膜均匀性等参数进行试验比较和评价,为该技术的应用提供依据。方法:采用GICA和酶联免疫吸附试验法(ELISA)对定值的抗2HCV质控品和672份血清标本同时测定,再结合物理试验,并对结果进行评价。结果:GICA和E
2、LISA均可检测出抗2HCV1NCU�ml,以ELISA为参照,GICA1、GICA2的灵敏度均为99.44%,特异性均为99.68%;GICA3灵敏度为94.93%,特异性为97.83%。假阴性均在弱阳性标本中,假阳性均显弱阳性带。渗透速度和均一性试验结果良好。结论:选用GICA前需做比对试验,对其弱阳性结果须ELISA方法确认。选择质量好GICA是一种较好的快速初筛方法。主题词胶体金免疫化学肝炎抗体,丙型丙型肝炎抗体采用胶体金免疫层析法(GICA)具按说明书操作,结果酶标仪测定A值;对每个定值样有快速、操作简便
3、、不需特殊设备、且可单份测定,在急品加样10孔测定。(2)特异性试验:收集30份经诊及临床应用中,具有较强的优势。我们对酶联免疫吸ELISA测定抗2HCV为阴性的血清标本,分别从3种附试验法(ELISA)和GICA两种方法检测抗2HCV作GICA试条中随意抽取10条进行复检。(3)重复性试比较,并对GICA的技术参数进行试验比较和评价,以验:收集经ELISA测定抗2HCV为弱阳性和阳性各10便为临床应用提供可靠依据。份血清标本,对每份标本分别从3种GICA试条中任材料和方法意抽取10条进行复检,观察GICA测定抗2
4、HCV的重1一般资料672份血清标本,均为2006年本复性。(4)GICA试条的渗透速度和均一性试验:在3院门诊及住院患者。丙型肝炎病毒携带者356例,其中种GICA中分别从每一种中任意抽取20条GICA试男211例,平均年龄31±9.8岁;女145例,平均年龄26条,以10条为一组,分别浸入同一份混合血清中,以试±10.3岁。对照组316例,其中男203例,平均年龄33条加样区接触血清开始记时,30s后取出,平放静置观±6.1岁;女113例,平均年龄30±7.7岁。察,待血清渗透至对照线出现肉眼可见颜色时,记录时
5、2试剂(1)检测抗2HCV的GICA试条3间,并以每组的平均时间作为渗透速度的指标。均一性种:GICA1英科新创(厦门)科技有限公司(批号观察是在测定受检标本时,连带观察100条每一种2006060703);GICA2广东万孚(批号W0560502S);GICA试条,以标本在滤膜上渗透时出现明显的未浸GICA3艾康生物技术有限公司(批号0608165)。(2)湿的斑块,或浸液后15min以上不能到达对照线的试检测抗2HCV的ELISA试剂盒两种:ELISA1上海实条判为不均一,计算各自百分率为试条的均一性指业科华生
6、物技术有限公司(批号20060617);ELISA2标。上海荣盛生物技术有限公司(批号20060615)。(3)抗24结果判断GICA:试纸条在检测线和对照HCV定值质控品:购于北京全国临床检验中心,线位置各出现一条红色反应线,判为阳性。ELISA:操1NCU�ml(批号0609)、2NCU�ml(批号0607)。(4)酶作步骤严格按说明书进行,以酶标仪判读标本的OD标仪:美国Bio2Rad550型。值,以Cutoff值为界判断结果。3方法(1)敏感性试验:对定值为1、结果2NCU�ml的2种抗2HCV质控品和67
7、2份血清标本,1采用3种GICA试条和两种ELISA试剂盒,对采用3种GICA试条和2种ELISA试剂盒同时测定。两种抗2HCV定值的质控品和672份受检血清标本测GICA法测定血清抗2HCV是将各试条的加样区直接定抗2HCV的结果见表1,2。ELISA法测定30份抗浸入血清中30s,取出后平放静置,在15min内间断观2HCV阴性的血清标本,以每种10条GICA试条复检,察并记录结果;对每个定值样品测定10次。ELISA法结果GICA1和GICA2均为阴性,GICA3有1条陕西医学杂志2008年6月第37卷第6期
8、729弱阳性,余均阴性。测定抗2HCV为弱阳性血清标本(1.36>A≥0.94),2重复性试验收集10份ELISA测定抗2每份标本用3种各10条GICA试纸条做重复测定,HCV为阳性血清标本(A≥1.36)每份标本均用3种各GICA1和GICA2各有一条阴性,其余均弱阳性;10条GICA试纸条做重复测定均阳性。10份经ELISAGICA3有两条阴性,余均弱阳
