高效液相色谱-串联质谱法直接定量分析植物酵素中多种氨基酸成分.pdf

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1、20l53JJ色谱Vo1．33NO．3March20l5ChineseJournalofChromatography309～3l3技术与应用DOI：1()3724／SP．J．1123．2014．10010摘要：利川效液十Il乜谱一f¨联质嘴(LC—MS／MS)疗法直接分析十rc物酚索ft多种术行亍，ji化的氨坫酸样品用甲酡稀释5俯，巡提取30min，离心10min(速度为l0000r／min)，收f消液分析．采川色谱VenusilASBC】8(250nlIllx4．6nlm，5¨m)分离．以⋯一乙酸一水

2、混合溶液为流动十I1体系进"梯度洗脱，流速为O．5mL／min，质谱喷雾l为3kV，离濉瞍为l50℃，厶溶齐lJ温发350℃，太溶制体流速800L／h。碰撞气氩气的流述保持力为0．17Pa以破测物的提取离r流峰面积进行定谴，分折h法的线性范嘲为0．5～200ixmol／L(’>0．99)，I-t川l(幻86％～1I()％，l，对ff【物酵索I，16种氦琏酸成分进"定分忻、陔，j法操作简便快速、准确靠，还适用r食I约fl搜人然物lfl多种鳆肇酸成分的定造分析关键词：r效液中¨包晰_i}{联质；术衔，化氨酸

3、；植物畔求中图分类号：0658文献标识码：A文章编号：1000-87I3(20l5)03—0309—05Abstract：AmethodwasestablishedforunderiVatizedaminoaciddeterminationinfermentedbeverageofplantextract．Samplesweredilutedwithmethanolforfivetimes，extractedbyultrasonicvibrationfor30min．andhigh—speedcentr

4、ifugedforl5rainatl0000r／min．Thesupernatantwasseparatedanddetectedbyhighperformanceliquidchromatography—tandemIllassspectrometry(HPLC—MS／MS)．ThechroI11at0graphiccolumnwasVenusilASBCl8(250nlnlx4．6IllIn．5ixm)．Theelutionwasperformedataflowrateof0．5mL／minusin

5、gthemobilephasesofmethanol—aceticacid—watermixture．TheMSdetectorwassetasfollows：ionsourcevoltage3kV．ionsourcetemperature150oC，solventtemperature350℃．gasflowrate800L／h．Thecollisiongaswasargonwithapressure0f0．17Pa．Thequantitationanalysiswascar—riedoutwithp

6、eakareainextractedionchromatograms．Goodlinearitieswereacquiredintherange0f()．5—20()ixlnol／L(r‘>0．99)fortheaminoacids．Therecoverieswerebetween86％andIl()％．Therewere15aminoacidsinthefermentedbeverageofplantextractlantitativelyanalyzed．Themethodissimple，rapi

7、d，accurateandreliableinquantitativeanalysisofaminoacidsamplesinthefieldsofpharmaceutical，foodandnaturalproducts．通讯联系人．E—mail：liuzq@ciac．j1．cn．基金项目：林省点科技发展汁划项目(20l20901)；吉林省jr}J旧科院科技合作高技术f、化々项资金项肼(20I3SYttZ0008)．收稿日期：2(Jl4—10—20·310·色谱第33卷Keywords：highper

8、formanceliquidchromatography—tandemmassspectrometry(HPLC—MS／MS)；undenv~izedaminoacid；fermentedbeverageofplantextract植物酵素(fermentedbeverageofplantex—基酸标准品：甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、丝氨酸tract’)是采用日本传统的发酵工艺，从50余种(Ser)、脯氨酸(Pro)、缬氨酸(Va1