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《外源性 TGF-β1对原代急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的影响及机制探讨-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、山东医药2014年第54卷第11期外源性TGF—I3。对原代急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的影响及机制探讨王蕾,李艳(中国医科大学附属第一临床医院,沈阳1lOOO1)摘要:目的观察外源性转化生长因子B(TGF一13)对原代急性早幼粒细胞白血病细胞(APL)凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法将APL细胞分为4组,对照组不加任何药物,实验组用终浓度为t、5、10ng/mLTGF.13处理(实验1、2、3组),分别处理24、48、72h,采用瑞氏一吉姆萨染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,免疫组化法检测TGF-p】、P27、CyclinE、bcl一2蛋白,RT—PCR技术检测TG
2、F一13l、P27、CyclinE、bcl-2mRNA。结果与对照组比较,实验1、2、3组24、48h细胞凋亡率升高(P均<0.05);与同组24h比较,实验1、2、3组48h细胞凋亡率升高(P均<0.05)。对照组细胞培养48h未见明显细胞周期阻滞;与对照组比较,实验1组48h细胞周期阻滞于G。期,实验2、3组APL细胞周期明显阻滞于G期。与对照组比较,实验2组TGF-13,、P27蛋白水平升高,CyclinE、bcl-2蛋白降低(P均<0.05)。1、23-actin条带亮度相同,实验2组(2道)P27p1mRNA条带亮度与对照组(1道)相同,P27plmRNA水平较对照组变
3、化不明显;1、213一actin条带亮度相同,实验2组(2道)条带亮度明显高于对照组(1道);实验2组CyclinE条带与对照组比较亮度减低,CyclinE表达下调。结论外源性TGF一13.通过上调TGF-B、P27及下调CyclinE、bcl-2作用,诱导细胞发生凋亡,使细胞阻滞于G期。关键词:转化生长因子p1;细胞凋亡;细胞周期;P27蛋白;CyclinE蛋白;bcl-2蛋白doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2014.11.007中图分类号:R733.7文献标志码:A文章编号:1002-266X(2014)11-0022-04Efectofexogen
4、eticTGF一131onapoptosisofprimaryacutepromyelocyticleukaemiacellsandthemechanismⅣG£.L/Yah(The£HospitalofChinaMedicalUniversity,Shenyang110001,China)Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofexogeneticTGF一131onapoptosisofprimaryacutepromyelocyticleukae-mia(APL)cellsandtoinvestigatethemechanism.Metho
5、dsAPLcellsweredividedinto4groups:thecontrolgroup,theexperimentalgroups1,2and3.Thecontrolgroupwasnottreatedwithanydrugs,buttheexperimentalgroups1,2and3wereseparatelytreatedwithTGF一131attheconcentrationsof1,5,and10ng/mLfor24,48and72h.Theapoptosiswasde—tectedbySwiss—Jimstainingmethodandcellcycle
6、wasdetectedbyflowcytometry.TheexpressionofTGF—pl,P27,Cyc—linEandbc1-2proteinandmRNAinAPLcellswasdetectedbyirmnunohistochemistryandRT—PCR.ResultsComparedwiththecontrolgroup,theapoptosisrateoftheexperimentalgroups1,2and3at24hand48hwasincreased(allP<0.05);ineachgroupexceptthecontrolgroup,theapop
7、tosisrateat48hwashigherthanthatat24h(allP<0.05).Inthecontrolgroup,afterbeingculturedfor48h,nocellcyclearrestwasshown;comparedwiththecontrolgroup,afterbeingcul·turedfor48h,thecellcycleofAPLceHsintheexperimentalgroup1wasblockedinG1stageandthece
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