急性早幼粒细胞白血病中annexin ⅱ高表达的分子机制

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1、急性早幼粒细胞白血病中AnnexinII高表达的分子机制计：学位论文：37页表格：3个插图：lO幅董小荣指导教师：闫金松教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：内科学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作

2、的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：茎d!盖、、签字日期：土出L年土月—生日关于学位论文使用授权的说明《急性早幼粒细胞白血病中Annexin11高表达的分子机制》系本人在大连医科大学攻读(博士、硕：t)学位期间在导师指导下完成的学位论文。本人及指导教师完全了解大连医科大学关于保存、使用学位论文的规定，同意学校保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版本，允许论文被查阅和借阅，同意学校将本论文加入：1．中国学术期刊(光盘版)电子杂志社——《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全

3、文数据库》及CNKI相关数据库。2．中国科学技术信息研究所——《中国学位论文全文数据库》3．固家图书馆本人授权大连医科大学，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文，可以公布论文的全部或部分内容。论文作者签名：盔_!立指导教师签名：闺：鳖侉签字El期：这盟L年—￡月—生日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯S(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)日IJ舌”一””一””一“⋯一一”””一一一“”一⋯一”一””””””””一一5(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOMOOOOO⋯⋯⋯⋯16(四)讨{仑···························································⋯·······21(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OODOO⋯⋯⋯⋯⋯25三、文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33四、致谢·”········································································37急性早幼粒细胞白血病中AnnexinII高表达的分子机制硕士生姓名：指导教师：指导小组：专业名称：董小荣闫金松教授康志杰主治医师李伟平主治医师陈雪瑜主治医师内科学摘要目的：在急性早幼粒细胞白血病(Acutepromyelocyticleukemi

6、a,APL)中，出凝血异常和特征性融合基因((PML／I认Ra)是两大突出特征，出凝血障碍包括DIC及原发性纤溶亢进，这主要归因于白血病细胞分泌过高的组织因子及AnnexinII。目前明确的观点认为APL原发性纤维蛋白溶解亢进是由于APL细胞中异常高表达的AnnexinII所致，而未有文献报道PML／RARo融合基因和AnnexinII的关系，本研究旨在阐明PML／RARo融合基因和AnnexinII之间的调控关系，进而构建含AnnexinII启动子的双荧光素酶报告基因质粒，以进一步揭示PML／RARo融合基因调控AnnexinII表达的分子机制

7、。方法：1．体外培养PR9细胞，Zn2+诱导PR9细胞O、O．5、1、2、6、12、24h，应用RT．qPCR和Westemblot技术分别在转录及蛋白水平检测上述时间点PR9细胞AnnexinII的表达情况。2．按照启动子截短分析策略，将AnnexinII基因5’侧翼的序列长度按不同段AnnexinII启动子片断构建到荧光素酶报告基因质粒中(·1074bp卜斗46bp，·641bp卜斗46bp，-374bp-一-46bp，-198bfPv+46bp，-91bp-,+46bp)，并通过双酶切及测序确定质粒的正确性。3．将正确构建重组质粒pGL3．

8、AnnexinII．promoter用脂质体法转染入COS．7细胞，分析PMI．爪ARa融合蛋白与Annexin11启动子转录活性。结果