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《猪胸膜肺炎放线杆菌apxiv-elisa鉴别诊断试剂盒的研制与应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2007,15(6):911~917·研究论文·猪胸膜肺炎放线杆菌Apx郁ELISA鉴别诊断试剂盒的研制与应用*1111211**贾凡, 胡军勇,王建银, 石碧,李树清, 陈焕春,周锐（1.华中农业大学动物医学院,农业微生物学国家重点实验室,武汉430070；2.上海出入境检验检疫局,上海200135）摘要：胸膜肺炎放线杆菌(,APP)是一种严重危害世界养猪业的重要病原菌，至少有15种血清型，根据所有血清型菌株仅在感染猪体内产生外毒素Apx郁的特点
2、，建立了一种能够区分感染猪与免疫猪的鉴别诊断方法Apx郁ELISA。研究在反应条件方面加以优化，将该诊断方法进一步研制成试剂盒，对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行了测试，与间接血凝试验及IDEXX公司的CHEKITAPPAPX郁试剂盒进行了对比研究，并用该试剂盒检测了来自中国、英国、丹麦、美国、加拿大、澳大利亚等国的临床猪血清1453份。结果表明,Apx郁ELISA试剂盒具有很高的特异性和敏感性，与CHEKITAPPAPX郁试剂盒的检测符合率为91.37%；3批试剂盒的批内和批间重复性良好（变异系数均<15%）；试剂盒在2～8
3、℃保存9个月内稳定性良好。所检种猪血样中，来自中国猪场1、中国猪场2、美国、加拿大、丹麦、澳大利亚和英国的Apx郁抗体阳性率分别为30.05%、70.69%、39.72%、0.64%、42.22%、1.85%和93.94%；所检我国2个规模化猪场的仔猪ApxIV抗体阳性率分别为21.77%和27.15%，育肥猪的阳性率分别为5.51%和11.07%。研究表明，Apx郁ELISA试剂盒能够有效区分APP感染猪与三价灭活疫苗或亚单位疫苗免疫猪。关键词：胸膜肺炎放线杆菌；Apx郁ELISA；鉴别诊断试剂盒中图分类号:S188文献标识码:
4、A 文章编号:10061304(2007)06091107DevelopmentandApplicationofApx郁ELISADifferentiatingDiagnostic Kitfor JIAFan 1,HUJunyong 1,WANGJianyin 1,SHIBi 1,LIShuqing 2, CHENHuanchun 1,ZHOURui 1** (APP)isthecausativeagentofporcinecontagiouspleuropneumoniawhichcausesgreateconomiclosse
5、sinthepigindustryworldwide.Thereareatleast15serotypesofAPPsothatitisverydifficulttodiagnoseandcontrolthisdisease.AnApx郁ELISAwhichcoulddistinguishthevaccinatedpigsfromAPPinfectedoneswasestablishedbasedonthefactthatthetoxinApx郁expressesonly inAPPinfectedpigs.Adifferenti
6、atingdiagnostickitwasdevelopedbythe optimizationofconditions,whosespecificity,sensitivity,repeatabilityandstabilitywereevaluatedandcomparedwithananalogousELISAkit(CHEKITAPPAPX郁)fromthecompanyIDEXXandtheindirecthaemagglutinationassay(IHA).Atotalof1453clinicalserafromCh
7、ina,UK,Denmark,USA,CanadaandAustraliawerescreenedusingtheApx郁ELISAkit.TheresultsshowedthattheApx郁ELISAkithadveryhighspecificity,sensitivity,repeatability[theinterandintrabatchimprecision(CV%)<15%]andstability(verystableat4~8℃for9months).Comparedwith CHEKITAPPAPX郁,theo
8、verallagreementratewasupto91.37%. TheApx郁antibodypositiveratiosofsowsfromChinaFarm1(CN1),ChinaFarm2(CN2),USA,Canada,Denmark,
