欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:53741006
大小:515.53 KB
页数:3页
时间:2020-04-21
《OPIDN致鸡大脑脑型肌酸激酶差异表达-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国公共生2014年7月第30卷第7期ChinJPublicHealth,Jul2014Vo1.30№.7·921··实验研究·OPIDN致鸡大脑脑型肌酸激酶差异表达李双月,朴丰源摘要:目的探讨有机磷化合物致迟发性神经毒性(OPIDN)鸡脑组织中脑型肌酸激酶同工酶(CK.BB)表达变化。方法罗曼鹤母鸡24只,随机分成三磷甲苯磷酸酯(TOCP)染毒组(1000mg/kg)、苯甲基磺酰氟(PMSF)干预组(在染毒之前给予40mg/kgPMSF)和对照组(生理盐水),每组8只。染毒第5和第2l天,每组分别处死8只动
2、物,分离大脑,提取总蛋白;用双向电泳和质谱分析技术,筛选相关差异表达蛋白。结果蛋白双向电泳结果显示,在染毒第5天,TOCP组与对照组、PMSF干预组与对照组的CK—BB蛋白点灰度比值分别为0.8583和0.9133,各组间差异无统计学意义(P>0.05);染毒第21天,TOCP组和PMSF干预组与对照组差异蛋白点CK—BB灰度比值分别为0.3275与0.6757,前者表达下调达3.0倍;对该蛋白点的质谱分析结果在Swiss—por数据库中进行比对,其与鸡种属、蛋白序列号为gil45384340的creatin
3、ekinaseB—type(CK—BB)蛋白的肽段匹配数为26,序列覆盖率为75%,评分值为1603(可信度高),显示该蛋白点即为CK—BB蛋白。结论OPIDN可致鸡大脑组织CK—BB蛋白表达显著下调,其变化可能与OPIDN模型动物神经组织损伤有关。关键词:迟发性神经毒性(OPIDN);脑型肌酸激酶同工酶(CK—BB);三磷甲苯磷酸酯(TOCP);苯甲基磺酰氟(PMSF);双向电泳分析中图分类号:R992文献标志码:A文章编号:1001—0580(2014)07—13921—03DOI:10.11847/zg
4、ggws2014—30—07—22Differentialexpression0fCK.BBinbraintissueofhenswithOPIDNLIShuang—yue,PIAOFeng—yuan(DepartmentofOccupationalandEnvironmentalHealth,DalianMedicalUniversity,Dalian,LiaoningPrvince116044,China)Abstract:ObjectiveTodetectdifferentialexpressionso
5、fbraintypeisoenzymeofcreatinekinase(CK—BB)inthebrainofhenswithorganophophorscompoundsinduceddelayednerutoxicity(OPIDN)andtoprovidetargetproteinevi—dencefordiagnosisofPOIDN.MethodsTwenty-fourRomanhenswererandomlydividedintothreegroups:treatedgroup(1000mg/kgt
6、riorthocresylphosphate,TOCP),intervenedgroup(40mg/kgphenylmethanesulfonylfluoride[PMSF]beforeTOCPtreatment),andcontrolgroup(tapwater).Eighthensineachgroupweresacrificedatday5andday20afterthetreatments;then,thebraintissueofthehenswereseperatedatlowtemperatur
7、eandtotalproteinofthebraintissuewereextracted.WithsolidphasePHgradientsodiumdodecylsulfate-polyacrylamidegelelectrophoresis(SDS—PAGE)andtwo—dimensionaleleetrophoresisandmassspectrometry,wedetecteddifferentlyexpressedCK—BBpro—tein.ResultsComparedwiththecontr
8、olgroup,thedifferenceinCK—BBexpressionwasnotsignificantatday5(P<0.05),whileatday20,thegraylevelratioofCK-BBexpressionoftreated—groupandintervened—groupwere0.3275and0.6757.withathree—folddown—regulation
此文档下载收益归作者所有