DNA修复相关基因甲基化与肺癌A549细胞顺铂化疗耐药的相关性研究-论文.pdf

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1、·122·中华实用诊断与治疗杂志2014年2月第28卷第2期JournalofChinesePracticalDiagnosisandTherapy·论著·DNA修复相关基因甲基化与肺癌A549细胞顺铂化疗耐药的相关性研究骆海军，李丽丽，李伟，张青梅。，陶建蜀。，高波，余宗涛，张吉才(1．湖北医药学院附属太和医院检验科，湖北十堰442000；2．十堰市中医院检验科，湖北十堰4420003．贵阳医学院检验系，贵阳550000)摘要：目的探讨5芬杂一2’脱氧胞苷(5-Aza一2’deoxycytidine，5-A

2、za—Cde)对顺铂耐药株肺癌A549／DDP细胞DNA修复相关基因hMLH1、MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及其表达的影响。方法A549细胞(A549细胞组)、A549／DDP细胞(A549／DDP组)、A549／DDP细胞5、1O、20~mol／L5-Aza—Cde组，分别采用甲基化特异性PCR检测细胞hMLH1、MGMT基因甲基化状态，反转录一PCR法检测用药前、后细胞hMLH1mRNA、MGMTmRNA表达情况。结果A549细胞组hMLH1基因呈非甲基化状态且高表达，MGMT呈部分甲基化状态且高

3、表达，A549一DDP细胞组hMLH1、MGMT基因均呈高甲基化状态，mRNA表达下调，10、2O>mol／L5-Aza—Cde组hMLH1和MGMT均呈非甲基化状态；A549／DDP细胞组、5“mol／L5-Aza—Cde组hMLH1mRNA与MGMTmRNA表达量均低于A549细胞组(P<0．05)，20umol／L5-Aza—Cde组与A549细胞组比较差异无统计学意义(P>0．05)；10~mol／L5-Aza—Cde组MGMTmRNA表达量低于A549细胞组(P％0．05)，hMLH1mRNA表达量

4、与A549细胞组比较差异无统计学意义(P>0．05)。结论hMLH1、MGMT基因甲基化修饰程度与mRNA表达有一定相关性，hMLH1、MGMT基因甲基化可能是肺癌A549细胞对顺铂耐药的因素之一。关键词：DNA甲基化；耐药；5一氮杂一2’脱氧胞苷；顺铂CorrelationbetweenDNArepairgenemethylationanddrugresistanceoflungcancercellA549tocisplatinchemotherapyLUOHai—jun，LILi—li，LIWei，ZHA

5、NGQing—mei，TAOJian—shu，GAOBo。YUZong—tao，ZHANGJi—cai(*DepartmentofLaboratory，TaiheHospitalAffiliatedtoHubeiUniversityofMedicine，Shiyan442000，China)Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsof5-Aza一2’一deoxycytidine(5-Aza—Cde)onDNAmethylationandexpressionofmism

6、atchrepairhMLH1andMGMTgeneinthehumanlungcancercelllineA549／DDP．MethodsThemethylationsofhMLH1andMGMTgenesweredeterminedbymethylation—specificPCR，andtheexpressionsofhMLH1mRNAandMGMTmRNAweredeterminedbyreversetranscription—PCRbeforeandaftertreatmentinA549group

7、，A549／DDPgroup，and5，10and20“mol／L5-Aza—CdeA549／DDPgroups．ResultsInA549group，hMLH1showednomethylationandwashighlyexpressed，andMGMTshowedpartialmethylationandwashighlyexpressed．InA549／DDPgroup，hMLH1andMGMTshowedhypermethylation，andhMLH1mRNAandMGMTmRNAweredown

8、regulated．In10and20／~mol／L5-Aza—Cdegroups，hMLH1andMGMTshowednomethylation．TheexpressionsofhMLH1mRNAandMGMTmRNAwere1owerinA549／DDPgroupand5／~mol／L5-Aza-CdegroupthatthoseinA549／DDPgroup(P<0．05)．andtherew