农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究.pdf

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1、河南农业科学，2014，43(5)：34—37JournalofHenanAgriculturalSciences农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究王奕，任贤，于志晶，蔡勤安，林秀峰，马瑞(1．天津市农作物研究所，天津300384；2．吉林省农业科学院生物技术研究中心，吉林长春13O033)摘要：利用农杆菌介导玉米愈伤组织遗传转化，研究了不同影响因子对玉米遗传转化效率的影响。结果表明，相比自交系H99，玉米杂交组合H99×A188更适宜作为玉米遗传转化的受体材料；继代6d后的胚性愈伤组织最适宜农杆菌转化；农杆菌菌株EHA

2、105的侵染效果好于EHA101；抗性愈伤组织筛选培养基中除草剂筛选的临界质量浓度为4．0mg／L；头孢霉素质量浓度在500mg／L时适合进行除菌处理，且对植株再生影响较小。关键词：玉米；愈伤组织；农杆菌；转化；影响因素中图分类号：S513文献标志码：A文章编号：1004—3268(2014)05—0034—04StudiesonInfluencingFactorsofAgrobacteriumtumefacienMediatedMaizeTransformationWANGYi，RENXian，YUZhi—jing，CA

3、IQin-an，LINXiu—feng，MARui(1．TianjinCropsResearchInstitute，Tianjin300384，China；2．BiotechnologyCenter，JilinAcademyofAgriculturalSciences，Changchun130033，China)Abstract：TheembryogeniccallusofmaizetransformationwasgeneratedbyAgrobacteriumtumefaciens．Theresultshowedtha

4、ttheresistantcallusregeneratedwasinfluencedbythegenotype，timeofcallussubculture，Agrobacteriumstrains，herbicideconcentrationandantibacterialagentconcentration．Thegenotypewasthemainfactoraffectingthegenetictransformationofmaize，andthecallisubculturedforsixdayswereop

5、timumforagrobacteriuminfection．TheAgrobacteriumtumefacienstrainEHA105wasbetterthanEHA101forinfection．Inselectionmedium，thehighestconcentrationofherbcidewas4．0mg／Landthesuitableconcentrationofantibioticswas500mg／L，whichhadthelowestinfluenceontheplantregenera—tion．K

6、eywords：maize；callus；Agrobacteriumtumefacien；transformation；influencefactor我国是世界上第二大玉米生产国[1]，玉米产业耐盐碱品种。随着现代分子生物技术的飞速发在国民经济中占有重要地位]。然而，土壤盐渍展，人们寄希望于基因_T程培育耐盐、抗旱品化和干旱已经成为影响玉米生产发展的主要限制种_[3]。应用转基因技术可定向改造植物的遗传性因素，因此，培育抗旱和耐盐碱玉米品种是育种工状，外源基因的转入打破了物种之间的生殖隔离作者急需解决的问题。虽然近年利用传

7、统的育种障碍，且丰富了基因资源，弥补了常规育种方法的方法使作物的抗旱和耐盐碱性得到了一定的改缺陷，使作物育种有了质的发展。当前已有多种良，然而由于玉米抗逆遗传资源匮乏，抗旱和耐盐玉米遗传转化方法，以农杆菌介导法应用最广。玉米品种的培育相对缓慢，至今尚未育成真正的1988年Grimsley等首次利用胭脂碱型根癌农杆收稿日期：2013—1O一16基金项目：农业部转基因专项(2009ZX08003—018B)作者简介：王奕(1981一)，男，天津人，实习研究员，硕士，主要从事植物基因工程研究。E—mail：wangyisheng

8、ji@163．com*通讯作者：林秀峰(1964一)，女，吉林自城人，研究员，硕士，主要从事作物遗传工程研究。E—mail：linxiufeng8581@163．com马瑞同为通讯作者。第5期王奕等：农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究35菌C58将玉米条纹病毒的cDNA成功转入玉米幼0．6左右时，室温