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《农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、分子植物育种，2006年，第4卷，第2期，第228-232页MolecularPlantBreeding,2006,Vol.4,No.2,228-232研究报告ResearchReport农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究袁鹰1李启云1郝文媛1谭化1孔祥梅1张光弟2刘德璞11吉林省农业科学院生物技术研究中心,公主岭,136100;2吉林省梨树县农业技术推广站,四平,136500通讯作者,liudp@cjaas.com摘要以东北春玉米自交系7922、340、78599、921及美国杂交种H99等幼胚愈伤组织为受体，利用农杆
2、菌介导法转化Bt(CryIA.)基因，研究菌液预处理、愈伤组织状态、侵染培养基、侵染时间及共培养条件等因素对转化频率的影响。根据转化愈伤组织的除草剂(Basta)抗性筛选结果评估转化率，表明继代培养3~5d的愈伤组织适于转化，其中以继代5d的7922愈伤组织转化率最高，为46.6%；不同基因型对农杆菌转化率存在差异，H99的抗性愈伤组织率为34.57%，7922为26.27%、340为21.36%、78599和921抗性愈伤组织率仅为8.02%和6.78%。基因型间差异显著；浸染培养基中加入(AS100~200mg/L)抗
3、性愈伤转化率明显提高；菌液浓度OD6000.5~0.6、侵染时间5~10min、共培养时间3d最佳。关键词农杆菌介导法,转化频率,影响因素,抗性愈伤组织StudiesonInfluencingFactorsofAgrobacteriumtumefaciensMediatedMaizeTransformationYuanYing1LiQiyun1HaoWenyuan1TanHua1KongXiangmei1ZhangGuangdi2LiuDepu11JilinAcademyofAgriculturalSciences,Gon
4、gzhuling,136100;2AgricultureGeneralizeStationofLishuCounty,Siping,136500Correspondingauthor,liudp@cjaas.comAbstractMaizeinbredlinesinNortheast(7922、340、78599etc.)immatureembryoscalliweretransformedbyAgrobacteriumtumefaciens(CryIABt.)inthisreport.Factorsinfluencing
5、transformationefficiencywerestudied,includingpre-treatment,callusstate,infectionmedium,infectiontimeandco-cultivationetal..Resultsshowedthatcallussubculturefor3~5dayswassuitablefortransformationandthattransformationefficiencyof7922callusreachedthehighestof46.6%aft
6、er5dayssubculture.DominantdifferenceexistedamongdifferentmaizegenotypeoninfectionsensitivityandH99wasthemostsensitivegenotypewith34.57%resistantcallus.Transformationeffi-ciencywasimprovedobviouslywithacetosyringone(AS)(100~200mg/L)appendedinmedium.Inaddition,bac-t
7、eriumconcentration(OD6000.5~0.6),5~10minutesinfectiontimeandco-culture3daysweretheoptimalcondi-tionsforAgrobacteriumtumefaciensmediatedmaizetransformation.KeywordsAgrobacteriumtumefaciensmediatedtransformation,Transformationefficiency,Influencingfactors,Resistantc
8、alli玉米是重要的粮食、饲料，又是制药、淀粉、糖浆、油料、酒精工业的主要原料。中国是世界上第二大玉米生产国，玉米在我国经济生产中占有非常重要的地位。在玉米生产上，虫害是导致玉米减产的重要危害之一。玉米螟是我国大部分主产区的主要玉米害虫，因而我国玉米害虫的综合防治研究基本上是围绕玉米螟展开的。玉米螟的防
