农杆菌介导的旱稻遗传转化主要影响因素.pdf

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1、第53卷第15期湖北农业科学V01．53No．152014年8月HubeiAgriculturalSciencesAug．，2014农杆菌介导的旱稻遗传转化主要影响因素李朝炜，冯丹，翟会青，刘梅，魏景芳(河北科技大学生物科学与工程学院，石家庄050018)摘要：以旱稻品种鲲旱1号为材料，对农杆菌介导的遗传转化中愈伤组织的诱导、筛选、分化等的影响因素进行了研究。将抗虫基因和bar抗性基因成功导入旱稻愈伤组织．经过筛选和分化最终获得了抗性植株。结果表明，改良的NB培养基适合于旱稻愈伤组织的诱导；当农杆菌浓度在0D600为0．

2、2—0_3，侵染时间为20min时。转化效果最好；用40mg／L的P筛选30d后，可以获得抗性愈伤组织；将已筛选的抗性愈伤组织在预分化培养基上培养57d能有效提高分化率。关键词：旱稻；农杆菌；遗传转化中图分类号：Q789文献标识码：A文章编号：0439—8114f2014)15—3482—05MainFactorsAfectingUplandRiceTransformationMediatedbyAgrobacteriumtumefacienLIZhao-wei，FENGDan，ZHAIHui-qing，LIUMei，W

3、EIJing-fang(DepartmentofBiologicalScienceandEngineering，HebeiUniversityofScienceandTechnology，Shijiazhuang050018，China)Abstract：UsingtheseedsofuplandriceKunhanNo．1astheexperimentalmaterials，theeffectsofmainfactorsincludinginductionofcalli．selection．andregeneratio

4、nontheuplandricetransformation~equencywereinvestigated．ThePjgeneandbarresistancegeneweresuccessfullytransformedintouplandricecalli．Theresistantplantswereobtainedbyscreeninganddifferentiation．TheresultsshowedthattheimprovedNBmediumwastheoptimalmediumforinducingupl

5、andricecalli．ThesuitableconcentrationoftheAgrobacteriumwasbetween0．2and0．3．Theincursiontimewas20rain．Resistantcallicanbeobtainedafterbeingscreenedintheselectivemediumwith40mg／LP】f0r30days．Theresistantcalliwerepre-differ—enticed5-7daysbeforedifferentiation．Thediff

6、erentiationfrequencyofcallicouldbeincreased．Keywords：uplandrice；Agrobacteriumtumefacien；genetictransformation早稻．也被称作陆稻．是水稻的变异型。其耐旱种植的栽培稻即旱稻栽培种．能节约大量的农业用性强，适于旱地、坡地等干旱生态环境下种植。其在水，充分利用土地资源，降低生产成本，提高经济效形态、生理等方面与水稻有不少的差别，一般在干益I2]。此外，旱稻采用直播种植的方式，省去了育秧、旱缺水的生长状况下表现明显据统计．

7、每生产插秧等环节．大大减轻稻农的田间劳动量．非常适500kg旱稻稻谷．用水量则仅为水稻用水量的10％用于目前国内农业劳动力短缺的现状20％缺水是我国农业生产所面临的严峻考验之大力发展旱稻还可为培育优质稻类新品种打一⋯此外，我国水资源时空分布不均匀，南方水资下基础。而其关键是进行品种选育。获得抗逆、优。源较为充沛，而北方水资源不到全国总量的20％。质、高产的旱稻品种。通过农杆菌介导法这一基因特别是进入7月中下旬．大部分地区降雨开始明显工程手段进行改良是稻类作物遗传转化的首选方减少．而水稻此时处于抽穗灌浆的关键时期．用水式]

8、。近年来．针对稻类作物遗传转化体系的研究需求量很大．同时现有选育和推广的稻作品种普遍绝大多数是以水稻为研究材料．而关于旱稻的研究抗旱性不足．致使很多地区缺水的现状已成为影响报道则主要集中在杂交育种、抗旱性测定、生理指水稻产量的重要原因之一因此大力推广适于旱地标测定、特定基因的标记定位、遗传多样性分析等收稿日期：201