欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:53703168
大小:83.50 KB
页数:2页
时间:2020-04-06
《[精品]配制固体培养基操作规程.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、配制固体培养基操作规程操作顺序操作内容操作要求1填写培养基成分单按所用培养基配方及其配制量,准确计算出备种成分母液及琼脂、蔗糖的用量,并按大、微、铁、有、调、琼、糖、pH的顺序,填写在“配制培养基成分单”上。2水锅加热在做培养基专用的不锈钢锅内,加进约为欲配培养基量的70-80%的蒸幅水或软化水(澄清后的凉开水),放在电炉上加热。3高压锅加水关闭高压锅排水阀,加软化水至安全水位线。4称取琼脂、蔗糖称取前,剪碎干胶条状琼脂,破碎蔗糖结块,须按1%以上的精度准确称量。5摆放培养瓶按预定分装瓶数,将洗净、晾(烘)干的培养瓶,在桌上摆放整齐。6量取和混溶母液把贮存各种所需母液的试剂瓶,按培养基成
2、分单所列顺序摆放整齐,再按配方用量顺序量取各成分母液,并混溶于烧杯屮。7加琼脂当水锅温度达9CTC左右时,加进称量好的琼脂,继续加热,不断匀速搅拌,严防糊锅。8加蔗糖待琼脂完全溶化后,撒入蔗糖,不停地搅拌。9加母液混溶液蔗糖溶化后,断电停止加热,边搅拌、边徐徐倒入母液混溶液。10加水定容加蒸憎水(或软化水)至标示欲配培养基量的锅壁记号。11调pH值用精密pH试纸,与比色卡比较:偏酸,滴入lmol/L的NaOH液;偏碱,滴入lmol/L的HC1液,少量多次进行调节,直至合乎要求为止。12分装培养基按不同组培目的所需的每瓶培养基用量,将培养基均匀分装于摆好的培养瓶内。然后在瓶M盖上消毒好的棉
3、塞或封口膜。13高压锅加热关闭进水口及放气阀,打开排气阀,通电加热。14培养基(瓶)封口棉塞上加盖牛皮纸(或直接用封口膜),并用棉线扎紧封口。15培养基(瓶)装锅瓶口向上,略向中心倾斜,瓶口不可贴于锅壁(防止冷凝水进入瓶内)。码放均匀,上方加盖三层牛皮纸吸湿,装锅不可过满,以加盖后不堵塞安全阀和放气阀的孔口为度。16高压锅封盖、开始灭菌封盖时应按顺时针顺序拧紧固定螺栓。在高压灭菌锅控制面板上选择温度121°C,时问为20分钟,按确认键开始灭菌。17培养基(瓶)出锅当灭菌结朿后,高压灭菌锅白动断电,打开锅盖,取出培养基(瓶)。18培养基(瓶)存放将出锅的培养基(瓶)整齐平放于接种室的存放架
4、上,并明确标示其培养对彖(种类、品种)、培养目的(诱导、继代、生根)或其它特定用途以及配制1」期。19高压锅排水打开排水阀,放尽锅内存水,以减少积垢。说明一、制定木操作规程的目的是:(1)防止发生差错,提高培养基质量;(2)使配制过稈井然有序,省时、省力、节省能源,提高T作效率。二、制定木操作规程所依据的条件是:(1)一人操作,一次配制8升培养基;(2)川2000W的电炉为水锅加热;(3)所用高压锅是“立式电热压力消毒器”(工作压力:137Kpa),并配有3-6KV的稳压电源控制器,因此,当上述条件有变化时,就应对相关操作顺序和操作要求作必要的调整或变动。
此文档下载收益归作者所有