白屈菜(罂粟科)中抗临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌类生物碱(可编辑).doc

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时间:2020-04-04

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1、白屈菜(罂粟科)中抗临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌类生物碱摘要目的:该项研究描述的是从H屈菜(鏗粟科)的地上部分分离的对抗临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的成分和抗菌活性成分的提取。方法:宏量肉汤稀释法测定MIC/MBC(最小抑菌浓度和最小杀菌浓度)结果:从地上部分(乙酸乙酯层)由生物测定引导的分离的大部分有效活性成分苯并菲碇生物碱8■拜基血根碱,8■拜基二氢白屈菜赤碱抗耐甲氧西林金黄色匍萄球菌有效的成分,MIC/MBC在0.49-15.63^1.95-62.50ug/ml结论。本文报

2、告的选择的抗菌活性成分从白屈菜属分离的8■疑基苯并菲噪类生物碱,他们可能对治疗已经创造了全世界的医院问题的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的传染的抗菌剂的开发有帮助的。耐甲氧西林金黄色简萄球菌是多药耐药的菌株。近些年来此耐药己经广泛的和被公认为全球性的医院问题。MRSA对B•内酰胺类,氨基糖廿类,荧光嗤诺酮类,大环内酯耐药,只对力古霉素敏感,但是I耐力古霉素金黄色窗萄球菌也已经被报告过了。是因为当前使川的抗生素的选择压力引起的,导致高发病率和死亡率。因此,迫切地需要开发新的活性剂。由于植物可以提出抗菌成分

3、保护他们6己免受生物进攻,从植物资源屮寻找活性成分可能是另—-种线索。白屈菜(白屈菜,H屈菜和屮文的H屈菜)是罂粟科的白屈菜属的唯一一种。它含有异嚨啾生物碱的不同类别。H屈菜的植化和药理性质包括抗菌活性已经被综述过了,在屮国,亚洲,欧洲的草药中对它的作用有浓厚的兴趣。白屈菜习惯被用作治疗胃溃疡,胃癌,口腔溃疡,肝病,和一般疼痛。白屈菜的提取物被证明对兽咲和人类的植物制剂和口腔一卫生剂是安全的。先前的白屈菜的化学研究报告分离异嚨財生物碱,比如白屈菜碱,白屈菜赤碱,血根碱,小漿碱,黄连碱,刺罂粟碱。它

4、们当中,白屈菜碱和原阿片碱显示抗肿瘤活性,和原小藥碱显示了抗菌活性和抗病毒活性,血根碱和白屈菜赤碱有抗炎活性。近来,两种苯并菲噪生物碱,8■疑基二氢血根碱,8■疑基二氢白屈菜赤碱匕经从白屈菜乙醇提取物屮被分离和鉴定作为乙酰胆-碱酯酶抑制剂。在我们白然产物的筛选屮,对抗多药耐药的菌株有作用,我们专注于传统草药用于对抗新的增强的病菌的生物碱活性。我们发现从白屈菜的地上部分提取的一种包含生物碱的抑制剂。更多的活性导向分离导致四种生物碱8■疑基二氢血根碱,8■疑基二氢白屈菜赤碱,二氢血根碱,和二氢白屈菜红

5、碱。这里,我们报告从提取物分离的四种生物碱和它们抗临床分离的MRSA的活性测定。方法菌株MRSA市昆明总医院重症感染性标木屮分离培养的。病菌由昆明总医院的临床微生物学实验室根据常规程序和标准的临床试验是标准化协会(CLSI)纯化和鉴定.标准菌ATCC25923(甲氧西林敏感金黄色簡萄球菌)由NICPBP,屮国,刀古霉索((EliLillyJapanK.K.,SeishinLaboratories)作为阳性对照。植物原材料和培养基白屈菜地上部分的粗提物包含总生物碱的10%从供应商(XianHongs

6、hengBiotech.Co.,China).标准的M-H琼脂和肉汤(杭州天和微生物试剂有限公司)作为细菌培养基。筛选作为抗菌部分粗提物(300g)首次从乙酸乙酯层分离出来。乙酸乙酯层在真空下浓缩成残余(45.3gEA)。浓缩物通过减压柱液相色谱法(VLC,acolumnliquidchromatographymethodwhichisperformedunderreducedpressure)在硅胶上(2()()・30()目,青岛,屮国)柱子和石汕瞇、乙酸乙酯、乙醇(12:1:0-5:1:2)梯

7、度洗脱系统。共分成23个部分(EA1-23)收集,EA被用先前描述的琼脂扩散法进行活性筛选。分离的部分用50%的DMSO制备为浓度3mg/mh用孔劲为6mm的在20ml的MHA上打孔,用20ul的浓度为1.5*108菌悬液涂在培养基上。70ul的提取物加入孔中,在35度下培养24小时,然后测抑菌圈。分离部分(EA1-3)对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌的抑菌圈在19.5・35mnY和选择的MRSA菌株军顶。(表1)活性部分的生物碱的分离和鉴定活性部分(EA1-3)反复被减压柱液相色谱法在硅胶(500目

8、)纯化EA3hhs(250mg)hhc<95mg)洗脱剂石油醴、乙酸乙酯、乙40:2:1-40:2:2)和EAlhsl40mg、(洗脱剂石油瞇、乙酸乙酯-40:1)EA2hc(80mg)洗脱剂石油瞇、乙酸乙酯-25:1.四种化合物的结构rfl光谱分析和核磁共振氢谱,核磁共振碳谱和文献描述对照进行鉴定。生物碱的抗菌活性Hhs,hhc,hs和he对不同菌群的最小抑菌浓度根据CLSI幺量肉汤稀释法沱的。简而言Z,在含有1000ug/m1的hhs和hhc和3000ug/ml的hs和he的试

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