多酚含量测定法-总酚含量测定法-Folin酚法-Folin-Ciocalteu试剂法-操作图解.doc

《多酚含量测定法-总酚含量测定法-Folin酚法-Folin-Ciocalteu试剂法-操作图解.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、多（总）酚含量测定法（Folin-Ciocalteu试剂法）李熙灿/XicanLi（广州中医药大学）[文献]XicanLi,JingLin,YaoxiangGao,WeijuangHan,DongfengChen.AntioxidantactivityandmechanismofRhizomaCimicifugae.ChemistryCentralJournal.2012;6(1):140.操作图解[溶液配制]1Folin-Ciocalteu试剂(0.25mol/L)的配制取2mol/LFolin-Ciocalteu试剂1mL，加蒸馏水7mL，充分混合，

2、得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。215%Na2CO3溶液（W/V）的配制取Na2CO3•10H2O溶3.0g，溶于20mL水中，混匀即得。3标准溶液的配制（以连苯三酚为例）精确称取连苯三酚标准品10mg．用水溶解并定容到50mL，得0.2mg/mL的对照品标准溶液。4连苯三酚标准曲线的绘制样品液浓度mg／mL加样量A7600.2mg/mL样品母液/mL补加溶剂95乙醇/mLA760平均值SD0.00000.500.030.0386670.01744200.500.02300.500.0630.0040.010.490.

3、150.1666670.0158610.010.490.1620.010.490.1880.0080.020.480.290.2946670.0036820.020.480.2990.020.480.2950.020.050.450.7490.7290.0167530.050.450.7080.050.450.730.0320.080.421.0881.0920.0043230.080.421.090.080.421.0980.040.10.41.3931.3943330.0318570.10.41.3560.10.41.4340.0480.120.38

4、1.7471.6360.0923070.120.381.5210.120.381.640.060.150.351.9831.9276670.0415160.150.351.8830.150.351.917A=32.16733*C+0.06012,R=0.998线性范围：连苯三酚0.00-0.06mg/mL，A值在0.039-1.928之间。5样品溶液的配制样品母液（1mg/mL）：精确称取样品2mg，用95乙醇溶解并定容到2mL，得1mg/mL样品母液。0.2mg/mL样品母液/mL补加溶剂95乙醇/mL次数现象0.20.3平行测三次变蓝如怀疑样品自身有

5、吸收，可加做空白对照组。用0.5mL95乙醇代替0.5mLFolin-Ciocalteu试剂+即可，注意观察A值大小。6多酚含量的计算依上述公式A=32.16733*C+0.06012,由A值即可求得浓度C值。7说明37.1不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；7.2Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2M，使用前最好稀释。也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4·2H2O),25g钼酸钠(Na2MoO4·2H2O),700mL蒸馏水，50mL85%磷酸及100mL浓盐酸装入

6、带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。滤液呈微绿色。置于冰箱中长期冷藏备用临用时稀释。（钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂，都比较贵)3