多酚含量测定法-总酚含量测定法-Folin酚法-Folin-Ciocalteu试剂法-操作图解.docx

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1、精品文档多(总)酚含量测定法(Folin-Ciocalteu试剂法)李熙灿/XicanLi(广州中医药大学)[文献]XicanLi,JingLin,YaoxiangGao,WeijuangHan,DongfengChen.AntioxidantactivityandmechanismofRhizomaCimicifugae.ChemistryCentralJournal.2012;6(1):140.操作图解[溶液配制]1Folin-Ciocalteu试剂(0.25mol/L)的配制取2mol/LFolin-Ciocalteu试剂1mL,加蒸馏水7mL,充分混合,得0.25mol

2、/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。215%Na2CO3溶液(W/V)的配制取Na2CO3?10H2O溶3.0g,溶于20mL水中,混匀即得。3标准溶液的配制(以连苯三酚为例)精确称取连苯三酚标准品10mg.用水溶解并定容到50mL,得0.2mg/mL的对照品标准溶液。4连苯三酚标准曲线的绘制样品液浓加样量A760度0.2mg/mL样品母补加溶剂95A760平均值SDmg/mL液/mL乙醇/mL00.500.030.0386670.0174420.00000.500.02300.500.0630.010.490.150.1666670.0158610.0040.

3、010.490.1620.010.490.1880.020.480.290.2946670.0036820.0080.020.480.2990.020.480.2950.020.050.450.7490.7290.016753。1欢迎下载精品文档0.050.450.7080.050.450.730.080.421.0881.0920.004320.0320.080.421.090.080.421.0980.10.41.3930.040.10.41.3561.3943330.0318570.10.41.4340.120.381.7471.6360.0923070.0480.120

4、.381.5210.120.381.640.150.351.9830.060.150.351.8830.150.351.9171.9276670.0415162.22.01.81.61.41.21.0A0.80.60.40.20.0-0.20.000.010.020.030.040.050.06PyrogallolConcentrationmg/mLA=32.16733*C+0.06012,R=0.998线性范围:连苯三酚0.00-0.06mg/mL,A值在0.039-1.928之间。5样品溶液的配制样品母液(1mg/mL):精确称取样品2mg,用95乙醇溶解并定容到2mL,得

5、1mg/mL样品母液。0.2mg/mL样品母液/补加溶剂95乙醇/次数现象mLmL0.20.3平行测三次变蓝如怀疑样品自身有吸收,可加做空白对照组。用0.5mL95乙醇代替0.5mLFolin-Ciocalteu试剂+即可,注意观察A值大小。。2欢迎下载精品文档6多酚含量的计算依上述公式A=32.16733*C+0.06012,由A值即可求得浓度C值。7说明7.1不同的分光光度计所测得的A值可能不一样,所以,同一次实验要用同一台分光光度计;7.2Folin-Ciocalteu试剂:可向试剂公司购买,一般其浓度为2M,使用前最好稀释。也可以自配方法如下:将100g钨酸钠(Na2W

6、O4·2HO),25g钼酸钠(Na2MoO4·2HO),700mL蒸馏水,50mL85%磷酸及100mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。滤液呈微绿色。置于冰箱中长期冷藏备用临用时稀释。(钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂,都比较贵)。3欢迎下载精品文档欢迎您的下载,资料仅供参考!致力为企业和个人提供合同协议,策划案计划书,学习资料等等打造全网一站式需求。4欢迎下载

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