自噬在顺铂诱导的食管癌细胞死亡中的作用

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1、·1198·中华实验外科杂志2OlO年9月第27卷第9期ChinJExpSurgSeptember2010，Vo1．27．No．9自怍，噬用·胸夕卜科·在顺铂诱导的食管癌细胞死亡中的刘东雷王建军杨洋刘全【摘要】目的观察自噬在食管癌EC9706细胞顺铂处理过程中的表达，探讨其表达与细胞死亡的关系。方法对数生长期EC9706细胞与顺铂共同作用0、3、6、12、24h后，Westernblot法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达；自噬特异性阻断剂3．甲基腺嘌呤(3一MA)分别在顺铂前1h、后1hlJH人

2、共同作用24h，用CCK一8法和流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化。结果顺铂处理细胞0、3、6、12、24h后LC3相对灰度值为0．33±0．04、1．13±0．18、1．92±0．25、0．89±0．12、0．584-0．08；在顺铂加入前、后1h加入3-MA细胞的抑制率分别为(33．58±2．45)％、(21．37±1．21)％，细胞凋亡率分别为(18．30±0．92)％、(12．80±0．61)％。结论顺铂可以诱导食管癌EC9706细胞自噬，在顺铂给药前期，自噬对细胞有保护作用，可以延迟凋亡

3、的发生；而在顺铂给药后期自噬则可能作为一种细胞死亡程序，进一步促进细胞死亡。【关键词】顺铂；食管癌；自噬；脱噬作用RoleofautophagyinesophagealcarcinomacelllineinducedbycisplatinUUDong—lei．WANGJian-jun，YANG，Q眦n．DepartmentofThoracicSurgery，UnionHospital，TonalMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnolog

4、y．既0n43∞22．ChinaCorrespondingauthor：WANGJian-jun，Email：btww@yahoo．con．cn【Abstract】0bjectiveToexploretheexpressionofautophagyinEC9706celllinewithtreatmentofCisplatin．andstudywhethertheexpressionlevelofautophagyisrelatedtothedeathinducedbyCisplatin．Method

5、sEC9706cellsinlogarithmicgrowthphaseweretreatedwithCisplatinfor0，3．6，12，24h．andthenWesternblottingwasusedtodetectmicrotubule—associatedprotein1lightchain3(LC3)ex—pressionlevels．AftertreatmentofEC9706cellswith3-Methy

6、adenine(3一MA)andCisplatinfor24hf3一MAw

7、asadded1hbeforeand1hafterCisplatinrespectively)．theapoptosisrateandcelldeathratewereexaminedbyflowcytometryandCCK一8assays．ResuitsTheproteinaveragevaluesofLC3were0．33±0．04．1．13±0．18．1．92±0．25．0．89±0．12，0．58±0．08at0，3，6，12，24haftertreatmentwithcisp

8、atin．r

9、espectivelv．TheinhibitoryrateaftertreatmentofcellswithCisplatinand3-MA(3一MAwasadded1hbeforeandlhafterCisplatinrespectively)was(33．58±2．45)％，(21．37±1．21)％，andtheapoptoticratewas(18．30±0．92)％，(12．80±0．61)％，respectively．ConclusionCisplatincaninduceautophag

10、yinEC9706．Intheearly，autophagycoulddelayapoptosis．However，intheend，autoph—agymaypromotecelldeath．【Keywords】Cisplatin；Esophagealcarcinoma；Autophagy；Apoptosis自噬是广泛存在于真核细胞的一种高度保守的机材料和方法制，参与了细胞器的代谢和再利用以及对细胞内生物能量的补充¨J。自噬也是细胞生长发育、成熟分化及