超声波协同酶法提取荔枝壳中总黄酮及抗氧化性.pdf

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1、2014年7月四JII师范大学学报(自然科学版)July，2014第37卷第4期JournalofSichuanNormalUniversity(NaturalScience)Vol_37．No．4超声波协同酶法提取荔枝壳中总黄酮及抗氧化性阮尚全，宋秋菊，何慧蓉，张裕，罗大英，兰子平(1．内江师范学院化学化工学院，四川内江641112；2．内江师范学院四川省高等学校果类废弃物资源化重点实验室，四川内江641112)摘要：以荔枝壳为原料，试验了超声波协同酶法提取荔枝壳中的总黄酮．考察了单因素乙醇体积分数、料液比、超声波功率、pH值、酶用量、提取温度和提取时间对黄酮提取率的影

2、响．采用正交试验确立了最优提取条件，即乙醇体积分数为50％、料液比为1：70、提取时间为100min、酶用量为0．12％，总黄酮的提取率达5．10％．提取物具有较强的清除·OH自由基及O·自由基的能力．关键词：荔枝壳；超声波；纤维素酶；黄酮；抗氧化性中图分类号：0629．9；0652．62文献标志码：A文章编号：1001～8395(2014)04—0574—05doi：10．3969／j．issn．1001—8395．2014．04．025荔枝(Litchichinens~Sonn．)为无患子科荔枝合利用价值具有重要意义属常绿乔木，是热带和亚热带的特色水果，主要分1材料与

3、方法布于我国广东、广西、福建、台湾以及四川I的合江县等地区．合江荔枝产量占四川全省的90％以上，1．1主要仪器与试剂2012年产量已达1100多万kg．荔枝壳为荔枝的外1．1．1主要仪器T6新世纪紫外可见分光光度计果皮，含有如花青素、红色素、黄酮类、酚酸和多糖(北京普析)、KQ一400KDB超声波清洗器(江苏昆类等多种活性成分，具有很高的药用价值J．黄酮山)、TD一5台式低速离心机(四川I蜀科)、DFT一是广泛存在于植物细胞内的细胞次生代谢、具有酚100型中药粉碎机(温岭)、电热鼓风干燥箱(重庆羟基的化合物，由于其自身被氧化而具有抗氧化作银河)、AE240电子分析天平(梅

4、特勒一托利多)、用，在体内和体外都具有较强的抗氧化性，对人的HH—s恒温水浴锅．毒副作用小，因而受到了国内外学者的高度重1．1．2试剂纤维素酶(11kU／G)，芦丁(BR)，三视J．纤维素酶能催化破坏细胞壁，改变细胞壁羟甲基氨基甲烷(BR)，亚硝酸钠、硝酸铝、无水乙的通透作用，利于细胞内含物渗出，同时其具有专醇、氢氧化钠等均为分析纯．一性，不破坏其他物质，保持其他物质的原生结构，1．2实验方法因此与传统提取方法相比，具有无毒、反应条件温1．2．1提取工艺流程荔枝壳清洗一烘干粉碎一和及催化活力可调控制等优势，在植物成分的提取溶剂浸泡酶解一超声提取一分离显色一测定．中得到了广

5、泛应用H；超声波在介质中传播时产生1．2．2黄酮的提取与测定试验用荔枝壳采自于的空化作用、机械效应、热效应、化学效应，可提高四川I合江县，材料洗净低温烘干、粉碎．准确称取一目标物从固相转移到液相的传质速率，提高提取产定量荔枝壳粉于提取瓶中，按照一定固液比加入乙率，同时不影响大多数有效成分的生理活性．醇和纤维素酶酶解，在一定的温度下超声提取，离本文将纤维素酶和超声波的优点相结合，以四川合心分离上层清液定容，按照文献[7]方法测定吸光江县产的荔枝壳为原料，建立荔枝壳中黄酮提取的度值，根据标准曲线回归方程得到提取液浓度，计新方法，并对提取物清除羟基自由基和超氧阴离子算总黄酮提取

6、率．自由基的能力进行了初步实验，对提高荔枝壳的综1．2．3芦丁标准曲线的绘制准确称取0．0200g收稿13期：2013—04—08基金项目：四川省教育厅自然科学基金(13ZAO004)资助项目通信作者简介：兰子平(1964一)，男，副教授，主要从事天然产物分离分析研究，E—mail：pzlan@aliyun．com第4期阮尚全，等：超声波协同酶法提取荔枝壳中总黄酮及抗氧化性575芦丁标准品溶解于体积分数30％的乙醇中，定容于方程为：吸光度A=0．0114c一0．0019，c／(txg／mL)100mL容量瓶中，得到0．20mg／mL标准液．准确为芦丁质量浓度，复相关系数R

7、=0．9993，芦丁质移取标准液0．00、1．00、2．00、3．00、4．00、5．00、量浓度在8．0～56．0~g／mL范围内线性关系良好，6．00、7．00mL于25mL比色管，按文献[7]方法加如图1所示．入质量分数5％的NaNO：溶液1．0mL，6min后加入质量分数10％的硝酸铝溶液1．0mL，放置6rain，加质量分数4％NaOH溶液10．0mL，用蒸馏水定容，在511nm处测定吸光度，绘制标准曲线．1．2．4单因素实验准确称取荔枝壳粉1．000g于100mL提取瓶中，做以下因素试验：固定料液比为1：30、pH