sirna沉默mcl-1基因对胃癌sgc7901细胞株生物学行为的影响

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1、·3704·广东医学2013年12月第34卷第24期GuangdongMedicalJournalDee．2013，Vo1．34，No．24siRNA沉默Mcl一1基因对胃癌SGC7901细胞株生物学行为的影响水刘金禄，王震，陈俊强，崔希刚，马鹏飞，黎伯培广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科(南宁530021)【摘要】目的探讨siRNA抑制Mcl一1基因表达后对胃癌细胞株SGC7901生物学行为的影响。方法化学合成针对Mcl一1的靶向siRNA(Mel—lsiRNA纽)，同时以转染阴性对照siRNA(阴性对照组)

2、、转染脂质体转染试剂(脂质体对照组)和空白细胞(空白对照组)作为对照。MrITr检测Mcl一1siRNA对SGC7901细胞增殖能力的影响，AnnexinV—FITC和PI双染观察细胞各组凋亡情况；PI单染观察各组细胞周期变化情况；转染48h后应用Transwell小室及Matrigel胶，通过计数细胞数目分析细胞侵袭迁移能力的变化。结果MTT检测结果显示用Mc1—1siRNA转染胃癌细胞SGC790124、48和72h后Mcl一1siRNA组与空白对照组、脂质体对照组、阴性对照组相比增殖能力显著下降(P<0．0

3、5)；转染48h后Mcl一1siRNA组s期细胞明显增多，同时，G／G。期、G2／M期比例相应减少，与各对照组比较差异有统计学意义(P<0．05)；侵袭、迁移结果显示Mcl一1siRNA组SGC7901细胞在转染后48h穿膜细胞数均较各对照组明显下降(P<0．05)。结论Mcl一1在胃癌的发生、发展及侵袭转移中发挥重要作用，RNAi抑制Mcl一1是胃癌基因治疗的一个潜在有效的方法。【关键词】胃癌；siRNA；Mcl一1；侵袭；迁移TheefectofsilencingMci一1bysiRNAonbiologica

4、lbehaviorofgastriccancerSGC7901cellline．LIUfin—lu，WANGZhen，CHENJun—qiang，CUIXi—gang，MAPeng一_厂e，LIBo—pei．DepartmentofGastrointestinalSurgery，theFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，ChinaCorrespondingauthor：CHENJun—qiang．E—mail：gxhans

5、@163．corn【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofinhibitingMcl一1geneexpressiononthebiologicalbehaviorofgastriccancercelllineSGC7901byusingasmallinterferenceRNA(siRNA)strategy．MethodsSynthesizedsiRNAtar-getingMcl一1wastransfectedintoSGC7901cells，whileSGC7901

6、cellstransfectedwithnegativesiRNAandLipo—fectamine2000，andvacantSGC7901cellswereusedascontrols．MTFwasadaptedtoinvestigatetheproliferationofSGC7901cellsaftertransfection．After48htransfectionofMel一1siRNA，thecellswerestainedbyAnnexinV—FIFCandPI，astheflowcytometr

7、ywasusedtoexaminetheapoptosiscells．CellcyclewasdetectedbyFCM．Polycarbonatemen—brahetranswellchamberandMatrigelwereusedforthedetectionoftheaherationofinvasionandmigrationcapacity．Re-suitsTheproliferationcapacityofSGC7901cellswassignificantlyimpairedaftertransf

8、ectedwithMcl～1siRNA(P<0．05)．TheSphaseproportioninMel一1siRNA1groupwassignificantlyhigherthanthatincontrolgroups(P<0．05)，withsignificantreductionintheG0／G1andG2／Mphasesproportions48haftertr