转基因大豆检测手段的研究-论文.pdf

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1、ChinaScience&TechnologyOverview生物转基因大豆检测手段的研究张秋楠(大庆日月星有限公司，黑龙江大庆163319)【摘要】中国很多大豆制品是利用进口转基因大豆进行加工的，产品中一定含有转基因大豆的成分，但是却未被标明，所以亟待对转基因大豆进行检测的手段，本文对转基因大豆的几种检测方法进行了综述。【关键词】转基因大豆成分PCP,．SDS—PAGE基因芯片酶联免疫吸附分析技术[Abstract]ManysoyproductsisproductedbyGMsoybe3ii，thes

2、eproductsmustcontainthegeneticallymodifiedsoybeancomposition，butisnotmarked，SOit'simorotanttOdetectionmethodsoftransgenicsoybeanInthispaper，severalkindsoftransgenicsoybeandetectionmethodsaresummarized．，[Keywords]transgenicsoybeancomposition；PCR；SDS——PAGE

3、；genechips；enzyme——linkedimmunosorbentassay我国为大豆的原产国也是大豆的主产国之一，但是近年来，个数量级。从理论上来说，用巢式和半巢式PCR可以检测到低于国外的转基因大豆大量涌人中国，中国国产大豆失去了价格优10一Ilg／L的DNA模板量。势，很多企业选择低成本的转基因大豆作为原料。中国是个饮食2基因芯片文化上很依赖大豆的国家，各种大豆制品充斥着我们的餐桌，但基因芯片是采用光导原位合成或显微印刷等方法，将大量是由于转基因大豆可能存在安全性问题，很多消费者选择不食

4、用DNA探针片段有序地固化于支持物的表面，然后与已标记的生物转基因食品，但是有调查显示我国存在很多大豆制品中是使用转样品中DNA分子杂交，再对杂交信号进行检测分析，就可得出该基因大豆制作的，但是都没有进行标示，所以在食品安全监测方样品的遗传信息。一次可以检验大量样品，但是造价较高，还有待面，亟待一种有效的检测产品中是否含有转基因成分的手段。本开发。文列出几种大豆制品的转基因成分的检测方法，并对其优缺点进行了综述。3酶联免疫吸附技术1PCR法酶联免疫吸附分析是指：应用一个酶标记的免疫反应物和一个免疫吸附剂

5、的酶免疫分析，通过不同的方法，可用于测定未知1．1PCR(polymeraseChainReaction)样品的浓度。Lipp等人在2000年建立测试和验证了基于ELISA的目前，种植最广的是抗草甘膦大豆由美国孟都山公司生产的抗草甘膦转基因大豆的特异性检测方法，这个方法利用CP4一转基因大豆，转基因大豆的外源基因epsps(5一enolypyruvyEPSPS(5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶)蛋白特异性抗体，初lshikimate-3-phosphatesynthase，来源于A．tumefacie

6、ns菌步研究表明，此方法可以检测大豆原料中的转基因成分含量范围株cp4)，调控元件上游为花椰菜花叶病毒CaMV35S启动子，下游在0．3％-5％之间。终止子为NOS，检测时主要针对这三种基因进行检测，而且还包括大豆的内源基因lectin，用于鉴别大豆。利用这四个基因片段的4蛋白质SDS—PAGE电泳特异性基因序列，利用PrimerPremier5．0设计四对引物，进行扩研究表明：利用SDs—PAGE蛋白电泳，发现转基因大豆中增，可以初步确定大豆中是否含有转基因成分。有研究结果表明，有一条分子量约为45k

7、u的蛋白带的表达量明显比非转基因大利用CTAB法提取大豆的总DNA，对大豆的CaMV35S启动子和豆强，这样可以在蛋白检测中，从表达量的大小来区分转基因大内源基因LectionPCR扩增，扩增片段长度为118bp和195bp，表豆与非转基因大豆，但是，这个实验中，由于无法引进转基因大明了大豆中有转基因成分。另有研究利用GUS标记基因和NOS终豆对应的原始非转基因大豆品种，只能与中国的大豆进行比对，止子的pBI221质粒作为PCR检测的阳性对照，在转基因大豆中扩所以结果仅作参考，但是这为转基因大豆的检测提

8、供了一个新增出了阳性结果，并利用Southern杂交验证了结果的可靠性。这思路。些研究都证明了利用PCR对转基因大豆进行检测是简便可靠的一种检测手段。5结语1．2巢式(nestedPcR)和半巢式PCR转基因大豆的检测方法多种多种，各有其优点和缺点，在实际在食品检验领域，很多时候我们要面对的是大豆制品，其中的检测工作中，要根据具体情况，选择一种行之有效的方法。的DNA被破坏，可供我们利用的有效的模板少，所以利用普通参考文献：PCR无法检测出