猪脂肪诱导转录物的克隆与组织分布-论文.pdf

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1、第34卷第2期郑州牧业工程高等专科学校学报Vol-34No．22014年5月JournalofZhengzhouCollegeofAnimalHusbandryEngineeringMay2014猪脂肪诱导转录物的克隆与组织分布王静，李巍(河南牧业经济学院，河南郑州450011)摘要：本试验研究了猪脂肪代谢的重要功能基因——脂肪诱导转录物(FIT)。根据Genebank提供的电子延伸序列和内标B—actin基因序列设计引物，分别以脂肪和肌肉组织mRNA为模板，经反转录和PCR反应，克隆得到了FIT1基因和FITlmRNA3’UTR区。对测序结果进行序列分析表明，

2、猪FIT1基因的cDNA序列，全长为1310bp，ORF为4001272bp，编码290个氨基酸。同源分析结果表明，猪FIT1基因与Genebank上已登录的牛、人、大鼠和小鼠的核酸序列同源性分别为93．2、92．1、87．4和88．1，氨基酸序列的同源性分别为96．6％、97．2、94．8和95．5。在此基础上，进一步研究了组织分布，显示结果为在肌肉和脂肪组织FIT1有明显分布，而在其它组织分布量很低。关键词：猪；脂肪诱导转录物；电子克隆；同源分析；组织分布中图分类号：$828文献标识码：A文章编号：1008—3111(2014)02—0025—03Molec

3、ularcloningandtissuedistributionofporcinefat—inducedtranscriptWANGJing。LIWei(HenanUniversityofAnimalHusbandryandEconomy，ZhengzhouHenan450011，China)Abstract：Theexperimentalstudyoftheimportantfunctionsofpigfatmetabolismgene——fat—inducedtranscript(FIT)．AccordingGenebankprovidesanelectro

4、nicextensionofthesequenceandtheinternalstandard8一actingeneprimersweredesigned，respectively，fatandmuscletissuemRNAasatemplate，reversetranscriptionandPCRreac—tions，theFIT1genewasclonedandFIT1mRNA3UTRarea．Sequenceanalysisofthesequencingresultsshowedthat，eDNAsequenceoftheporcinegeneFIT1l

5、engthis1310bp，ORFof400—1272bp，encoding290aminoacids．HomologyanalysisshowedthatporcineFIT1andnucleicacidsequencesofbovine，human，ratandmousewere93．2、92．1、87．4and88．1andaminoacidsequencehomologywas96．6％、97．2、94．8and95．5．Basedonthis，furtherstudiesoftissuedistribution，theresultisdisplayed

6、inthemuscleandadiposetissuedistributionFIT1significantly，andinother1OWtissuedistribution．Keywords：porcine；fat—inducedtranscript；insilicocloning；homologyanalysis；tissuedistribution随着人类肥胖症以及由肥胖症所引发的心血管脂滴具有贮存甘油三酯的特殊功能。在哺乳动疾病、Ⅱ型糖尿病、高血压和癌症的发生，研究者发物细胞中，激素信号转导、脂滴蛋白和脂肪酶的调节现人类的健康与人们重要的肉食性食品一猪

7、肉的品都属于脂滴代谢的过程。人们虽然知道了脂滴的代质有关，而影响猪肉品质的重要因素是猪体内脂肪谢过程，但是关于它的生物学分子机制还不清沉积的多少[1]。脂肪诱导转录物(FIT)是脂肪组楚_3]。有研究表明，降血脂药是过氧化物酶增殖装成脂滴起关键作用的基因，主要参与脂类代谢的体激活受体(PPARa)核激素受体特异的促效药，激氧化。脂滴在正常生理条件下起稳定能量平衡的作活PPAR~，并增强大部分8一氧化的生物化学组分用，然而在极端情况下，患肥胖和其它疾病的风险增基因表达。目前在人类和小鼠中对脂肪诱导转录物加。目前只有哺乳动物、啤酒酵母和果蝇的脂滴的进行了深入研究[5

8、]，而没有猪方面的报道，