米糠多糖和大豆多糖的结构特征及免疫调节活性比较-论文.pdf

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1、2013年6月中国粮油学报Vol_28．No．6第28卷第6期JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociationJun．2013米糠多糖和大豆多糖的结构特征及免疫调节活性比较易阳张名位魏振承黄菲(广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所，广州510610)(武汉工业学院食品科学与工程学院，武汉430023)摘要以米糠和豆粕为原料，采用热水浸提制备米糠多糖(RBP)和大豆多糖(SBP)，并分析其结构特征及体外免疫调节活性的差异。通过凝胶过滤色谱法和紫外／红外光谱法证实RBP和SBP均为蛋白多糖，结合化学组成分析确定其多糖与蛋白的

2、质量比值分别为7．7l和1．90。RBP主要由葡萄糖和甘露糖(物质的量比4．27：1．00)组成，而SBP主要由葡萄糖、半乳糖和甘露糖(物质的量比5．55：3．49：1．00)组成。相比空白组，两种多糖在50～400g／mL剂量范围内显著刺激ConA诱导的脾淋巴细胞增殖(P<0．05)，但仅在5Og／mL剂量下促进正常和LPS诱导的增殖(P<0．05)。在该剂量范围内，RBP和SBP均能明显增强巨噬细胞的吞噬功能，但前者抑制其NO生成，而后者剂量依赖性促进NO生成。米糠及豆粕中多糖作为免疫佐剂具有良好的开发前景。关键词米糠大豆多糖结构免疫调节中图分类号：TS22

3、9文献标识码：A文章编号：1003—0174(2013)06—0050—06稻谷和大豆是极其重要的粮油资源。2010年，究采用热水法从米糠和豆粕中提取分离粗多糖，分我国稻谷产量接近2亿吨，而以大豆为主的豆类产析比较其结构特性及体外对淋巴细胞和巨噬细胞的量也有近0．2亿吨¨J。米糠和豆粕分别是稻谷和大免疫刺激作用。豆加工的主要副产物，目前绝大部分作为动物饲料原料被廉价消耗掉。为提高米糠和豆粕的经济附加1材料与方法值，其功能活性成分，特别是多糖的生物活性评价及1．1材料及试验动物和细胞开发利用受到广泛关注。多糖能有效调节机体免疫脱脂米糠、豆粕：广东省农业科学院农业生

4、物技功能，且不会产生(显著的)毒副作用。香菇多糖、云术研究所粮油加工与功能食品实验室；RAW264．7细芝多糖和裂褶菌多糖等，作为理想的免疫佐剂在临胞：中山大学实验动物中心，由本实验室继代培养；床应用上表现突出J。而灌胃一定剂量的米糠多糖体重(20±2)g的BALB／C雄性小鼠：南方医科大学或大豆多糖均能明显提升正常小鼠免疫系统功能，实验动物中心，在9～10周龄时进行试验。对淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬功能有显著的增强1．2试剂及仪器作用I5j。但其能否直接刺激细胞免疫应答，以及是RPMI1640培养基、DMEM培养基和胎牛血清：否作用于相同的效应细胞，尚鲜见报道

5、。多糖主要美国Gibco公司；甲基噻唑基四唑(MYr)、刀豆球蛋通过细胞表面受体与淋巴细胞和巨噬细胞结合，进白A(ConA)和脂多糖(LPS)：美国Sigma公司；考马而触发一系列的免疫应答反应，其构效关系的本质斯亮蓝试剂盒：南京建成生物工程研究所。在于多糖结构与受体亲和力的强弱一。多糖的结SBS—Z100数控计滴自动部分收集器、L一2恒构复杂且多样，不同结构对免疫细胞受体的亲和力流泵：上海青浦泸西仪器厂；Nexus5DXC红外分光光不同导致其活性有所差异，而关于米糠多糖和大豆谱仪、MK3酶标仪：美国赛默飞世尔公司；MCO一175多糖的免疫调节活性强弱尚未可知。

6、鉴于此，本研水套式CO培养箱：日本三洋公司；Agilent6890—基金项目：国家科技支撑计划(2012BAD33B10)，广东省重大科5973气质联用仪：美国安捷伦科技有限公司；L一技专项(2010B0807O1104)收稿日期：2012一O8—258900氨基酸自动分析仪：日本日立公司。作者简介：易阳，男，1986年出生，博士，食品科学1．3米糠多糖和大豆多糖的制备通讯作者：张名位，男，1966年出生，研究员，博士生导师，植物活性物质及功能食品米糠多糖和大豆多糖的提取方法参考文献[8]，第28卷第6期易阳等米糠多糖和大豆多糖的结构特征及免疫调节活性比较51略

7、有修改。50g原料加入500mL蒸馏水，在80℃水再弃去上清液，并用PBS洗涤3遍，每孔加入细胞裂浴下恒温搅拌浸提4h。4500r／rain离心10rain分解液100IxL，4℃下放置过夜。于570nm下用酶标离上清液(米糠上清液需采用酶法除去可溶性淀仪测各孔A值。吞噬指数PI=(A刺激组～A卒白组)／粉)，过滤分离提取液。采用Sevag法去除蛋白后，真A空白组×100％。空旋转蒸发浓缩提取液。将浓缩液转入透析袋(分5×10cells／mL的RAW264．7巨噬细胞以500子截留量8000)中，在大量4℃蒸馏水中透析72h。I／孔加入24孔板中，于培养箱中孵育

8、3h后，由4500r／r