血液分析仪检验临床检验基础.ppt

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1、血液分析仪及其临床应用hematologyanalyzerandclinicalapplication重点:1、血液分析仪测定的原理、方法2、血液分析仪各参数临床意义血液分析仪自动血液分析仪(automatedhematologyanalyzer,AHA),早年称血细胞计数仪(bloodcellcounter)是目前国内外临床检验最常用的筛检仪器之一。Coulter1947年发明了利用电感应区检测颗粒大小和数目的库尔特原理1953年,制造出世界上第一台颗粒粒度分析仪,成为颗粒计数经典方法1958年,库尔特公司成立创办库尔特基金,热心社会公益事业。库尔特(美国通用电气公司员工)在

2、上海工作时所拍照库尔特与李俊的差别:社会价值观的差别日照香炉生紫烟,疑似熊猫在烧香。06年毒王“熊猫烧香”电脑病毒。病毒原始制作者25岁的网络天才李俊。正确社会价值观:敬业、爱心、责任感血细胞分析仪近年来的发展变化1.血常规检验多参数化2.多功能合成扩展3.检测速度的提高4.方法的改进和进展5.应用的方便性一血液分析仪检测原理检测原理电学光学电阻抗法激光散射法射频电导法分光光度法P93血液分析仪功能:①全血细胞计数功能。②白细胞分类功能。③扩展功能。2库尔特原理图电极和稀释液构成电流回路细胞通过小孔电极感应电阻变化,将其转换成脉冲脉冲的数量代表细胞数量脉冲大小反映细胞体积大小。

3、脉冲检测器(一)电阻抗法原理(库尔特原理)1库尔特原理利用电阻抗法测量细胞的数量和体积。血细胞是电的不良导体,当一个细胞通过计数小孔时,会导致小孔两端电阻的变化,将其转化成脉冲,感应器通过检测脉冲的数量及大小,从而计算出通过小孔的细胞数量及体积。细胞体积越大,脉冲振幅越高;细胞数量越多,脉冲数量也越多。3电阻抗法仪器的主要组成电阻抗法仪器的主要组成包括:①信号接收器各种微粒通过检测小孔产生电阻抗脉冲信号的检测源。②放大器将血细胞微弱脉冲信号放大以触发电路系统。③阈值调节器调节能区分不同群细胞合适的信号电平。④甄别器去除非参考电平的各种假信号以提高计数的准确性。⑤整形器将不一致的

4、脉冲波形信号调整为标准的波形后触发计数电路系统。⑥计数系统将整形后的血细胞脉冲信号显示为不同类群的细胞数。二、激光散射法激光散射法应用了流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测原理。流式细胞术检测原理:细胞通过激光束被照射时,产生与细胞特征相应的各种角度的散射光。对经信号检测器接收的散射光信息进行综合分析,即可准确区分正常类型的细胞。P94低角度散射光(前向散射光):反映细胞的数量和表面体积大小。高角度散射光(侧向散射光):反映细胞的内部颗粒、细胞核等复杂性。P94表3-1激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时,比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代

5、五分类血液分析仪的主要检测原理之一。流式细胞仪的技术特点流式细胞仪在设计上采用了许多独特的技术,比如液流系统、光路系统、信号测量和细胞分选方面都有自己的技术特点。鞘流原理雷诺系数ReRe=dρν/ηd:管子的直径ρ:液体的密度ν:液体的流速η:液体的粘滞系数Re<2300,液流处于稳流状态Re>2300,液流处于湍流状态通常把标本流的流速控制在10m/s以内,就能保持标本流处于稳流状态。外面包被有高速流动的鞘液,实现标本与鞘液稳定的同轴流动状态。同时利用液流聚焦原理,使标本流直径变小,通常只有10~20μm,避免细胞多个重叠进入检测区。激光散射法系统基本组成1、光源气体(氦-氖

6、)激光或固体(半导体)激光(单色光);钨光源(多色光)。2、鞘流维持颗粒于液流中央,顺序、单个、恒速向前流动,即流体动力学聚焦。3、细胞悬液被检测细胞(颗粒)的悬液,由气压导入流动池。4、光检测器接受来自各种角度的散射光或吸收光信号,并转换成相应特征的电信号三、射频电导法射频(radiofrequency,RF)指射频电流,是每秒变化大于10000次的高频交流电磁波。高频电流能通过细胞壁。用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞的导电性,提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质、颗粒成分等特征信息。P94四、分光光度法分析仪检测Hb的原理:被稀释的血液加入溶血剂后,红细胞溶解,释放血

7、红蛋白,后者与溶血剂结合形成Hb衍生物,在特定波长(530~550nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb含量成比例。P96血红蛋白血红蛋白衍生物吸光度Hb浓度λ=540nm溶血剂血液分析仪检测参数原理一、白细胞系列参数检测原理根据电阻抗的原理,不同体积白细胞(35-450)fL产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞:35—90f1160fl以上90~160f1(一)电阻抗法仪器将体积为35~450fL的血细胞,分为256个通道(channel)。每个通道:1.64fl。根据细胞大小,分别

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