柱后补偿-液相色谱-电喷雾式检测器测定饮料中的三氯蔗糖.pdf

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1、第42卷分析化学(FENXIHUAXUE)来稿摘登第12期2014年12月ChineseJournalofAnalyticalChemistry1869—1870一来一DOI：10．ns95／j．issn．0253-3820．140772一登一柱后补偿-液相色谱-电喷雾式检测器测定饮料中的三氯蔗糖黄超群刘绿叶吕春华楼成杰金燕(浙江省检验检疫科学技术研究院，浙江310016)(赛默飞世尔科技(中国)有限公司，上海201023)1引言三氯蔗糖，又名蔗糖素，属于紫外末端吸收化合物，极易溶于水，甜度为蔗糖的600倍，且甜味

2、纯正，甜味特性曲线几乎与蔗糖重叠。它是以蔗糖等为原料经脱氧、氯化衍生而得到的半天然半合成产品，属非营养型强力甜味剂，在人体内几乎不被吸收，热量值为零。1990年联合国粮农组织和世界卫生组织(FAO／WHO)的食品添加剂专业委员(JECFA)认定其每日允许摄入量(ADL)值为15mg／kg，即每天允许摄入量为0～15mg／kg体重。若超量食用，仍可能引起各种形式的毒性表现。因此必须加强对三氯蔗糖的含量控制，发挥其有利作用，防止不利影响。目前，对于食品中三氯蔗糖的检测主要采用液相色谱．示差折光法、液相色谱一蒸发光散射法

3、J、离子色谱法J、液相色谱一质谱联用法等。电喷雾式检测器(CAD)，作为一种新型通用型检测器，对紫外末端吸收的化合物灵敏度相对较高，已被应用于胆汁酸、葡萄糖、果糖等的测定。因此，本研究采用高灵敏度及重现性的电喷雾式检测器测定饮料中三氯蔗糖。同时，在实验中采用柱后补偿技术进行有机相补偿，提高了雾化效率，增加了响应值，降低检出限。相比GB／T22255—2008的蒸发光散射法的定量限14mg／kg，本方法将两项技术结合，其灵敏度更高，方法定量限达到1．0mg／L。饮料样品经过简单过滤后，可以直接进样分析，无溶剂干扰，基

4、线漂移较少。本方法操作简便、准确度高，完全能满足饮料中三氯蔗糖含量的测定。2实验部分2．1仪器与试剂UltimateDGP3600高效液相色谱仪，配有双三元梯度泵和电雾式检测器(美国Thermofisher公司)；超声波清洗仪(昆山超声仪器厂)。三氯蔗糖标准品(纯度>97％，美国Supelco公司)；乙腈(HPLC级，美国Merck公司)。标准溶液：称取适量三氯蔗糖，用水溶解，配制成1000mg／L标准储备液。用水稀释成浓度为1．0，5．0，10，20和50mg／L的标准工作溶液，于4℃避光保存。2．2样品前处理取

5、适量样品，经超声脱气，过滤，供液相色谱检测。实际检测样品为市售某品牌可乐、功能型饮料及植物型饮料。2．3色谱条件AccucoreC色谱柱(150mm×2．1mm，2．6m)；分析泵的流动相：水(A)一乙腈(B)，梯度洗脱：0—6．00min，10％～30％B；6．01—10．00rain，30％～50％B；10，00—15．00min，50％B。补偿泵的流动相：乙腈。流速：分析泵0．3mL／min，补偿泵0．7mL／min。进样体积：10；柱温箱：25℃。补偿泵流动相与分析泵流动相在色谱柱后三通相接，混合后进入电雾

6、式检测器进行定量分析。采集频率：5Hz；过滤参数：3．6；干燥温度35℃；PFV值为1．2。3结果与讨论3．1柱后补偿分析电雾式检测器的响应值较依赖于液相色谱洗脱液的雾化效率。一般通过增加有机相比例，可以提高雾化效率，从而增加响应值，降低检出限。因此，本研究将双三元高效液相色谱仪中的一套泵系统设置为补偿泵系统，流动相为100％乙腈。结果表明，与不加补偿方法相比，增加有机相补偿后，峰高响应值增加约30％(见图1)。3．2电雾式检测器参数优化电雾式检测器的原理及智能化设计，无需对多种参数进行优化，本实验仅对雾化干燥温度

7、和采集频率进行了优化。当雾化温度分别为25，35和5O℃，目标化合物响应值略有增加，但基线噪音也随之增加。综合考虑，雾化温度尽量与柱温相近，实验选择35℃作为雾化温度；同时，对采集频率(2，5和10Hz)进行考察，同紫外检测器一样，采集频率增加，基线噪音更明显，数据量也较大增加，在满足三氯蔗糖检测条件下，选择5Hz作为检测器采集频率。3．3标准曲线，检出限和回收率取所配制的系列标准工作溶液，在2．3节色谱条件下测定，所得标准品谱图见图1，三氯蔗糖保留时间为5．88min。以三氯蔗糖峰面积Y(pAmin)与其对应的浓

8、度(mg／L)进行线性回归分析，线性方程为Y=0．1412x一0．0614，相关系数r=0．9998。按信噪比S／N>10作为方法的定量限，饮料中三氯蔗糖的定量限为1．0mg／L。相比蒸发光散射法的定量限，有很大的降低。3．3回收率在3份空白样品，分别加入5．0，10．0和15．0mg／L的三氯蔗糖溶液1．0mL，做标准加入回收实验。结果2014-08-31