常规液相色谱柱测定早熟素Ⅱ的方法探讨

《常规液相色谱柱测定早熟素Ⅱ的方法探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、生态环境学报2009,18(5):1914-1916http://www.jeesci.comEcologyandEnvironmentalSciencesE-mail:editor@jeesci.com常规液相色谱柱测定早熟素Ⅱ的方法探讨1,221,22*张桂花，李光义，文少白，李勤奋1.海南大学环境与植物保护学院，海南儋州571737；2.农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室//中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，海南儋州571737摘要：通过使用市售的常规C18液相色谱柱（规格：150m

2、m×4.6mm，5μm），探讨了早熟素Ⅱ的分析方法并对其进行了可-1行性论证。以V(甲醇)∶V(水)=80∶20为流动相，流量1mL·min，检测波长为224nm，柱温35℃。得出早熟素Ⅱ在8～108-1-1μg·mL的范围内呈良好的线性关系（相关系数r为0.99997），最低检出限为1.0379μg·mL（信噪比为3），加标回收率为93.3%～104.98%，变异系数为0.12%~4.41%。与使用非常规色谱柱分析早熟素Ⅱ的方法相比，该方法采用了市售常规柱，能够更大限度地满足实验条件，通用性更强。关键词：早熟

3、素Ⅱ；高效液相色谱法；常规柱中图分类号：X703文献标识码：A文章编号：1674-5906（2009）05-1914-03早熟素Ⅱ别名6,7-二甲氧基-2,2-二甲基-3-色R-215旋转蒸发仪。[1]烯，分子式如图1是一类抗保幼激素类似物。该试剂：甲醇（色谱纯），甲醇（分析纯），超纯物质首次于20世纪70年代由Bowers等从观赏植水，石油醚（分析纯）。物熊耳草（Ageratumhoustorianum）中分离得到,与标准品：早熟素Ⅱ标准品购于上海波以尔化工其同时发现的还有早熟素Ⅰ，由于这两种物质能够有限公司

4、。[2][6]使某些半翅目若虫提前变态，故命名早熟素。早样品：按照胡飞等人的方法(略有改动)制备熟素Ⅱ是苯并吡喃类化合物，为浅黄色针状晶体或胜红蓟鲜样水提液，将浓缩后的水溶液多次用柱色油状液体，易溶于石油醚、乙酸乙酯、丙酮等有机谱分离（200~300目硅胶，以石油醚为淋洗液），[3]溶剂，难溶于水。早熟素Ⅱ除了可以使某些昆虫收集含早熟素Ⅱ的黄色溶液，将该溶液旋转蒸发浓[4]提前变态外，还被证明具有较强的化感作用。近缩，用甲醇（分析纯）溶解浓缩液后过自装层析柱，年来利用高效液相色谱法测定早熟素Ⅱ的方法已把过柱后的

5、溶液再旋转蒸发，用甲醇（色谱纯）定[5]有报道，但该方法中采用的液相色谱柱为市售非容，即得供试用样品溶液。常规柱(规格：125mm×4.0mm，5μm)，因此其应自装层析柱（10mm×300mm）：由下到上分用范围具有一定的局限性。为寻找适用范围较广的别装入1g无水硫酸钠（650℃灼烧4h），1g柱检测早熟素Ⅱ含量的方法，本文探讨了利用市售常层析硅胶（200~300目，130℃活化8h），0.5g规液相色谱柱测定早熟素Ⅱ的方法，从而使该物质无水硫酸钠。的分析测定更加简便。2实验方法2.1色谱条件色谱柱：Luna

6、-C18柱(150mm×4.6mm，5μm)，-1柱温35℃，流量：1mL·min，进样量：10μL。2.1.1检测波长的选择图1早熟素Ⅱ的分子结构图在190～380nm范围内对早熟素Ⅱ标准品的紫Fig.1MolecularstructureofPrecoceneⅡ外吸收进行了波长扫描，早熟素Ⅱ的最大吸收波长1仪器与材料为224nm，因此选择224nm作为早熟素Ⅱ的检测Dionex高效液相色谱仪：P680泵，Ultimate波长。3000自动进样器，PDA-100光电二极管阵列检测2.1.2流动相的选择器。岛津

7、AUY220电子天平，DL-360B智能超声波-1在波长224nm、流量1mL·min、进样量10μL清洗器，XW-80A漩涡混合器，隔膜真空泵，Buchi的条件下，选用了不同配比的甲醇/水为流动相进行基金项目：国家自然科学基金项目(No.30860066)；海南省自然科学基金项目(No.30612)；中国热带农业科学院博士启动基金作者简介：张桂花（1983年生），女（内蒙古兴安盟人），硕士研究生。E-mail:zhangguihua123123@yahoo.com.cn*通讯作者，李勤奋，E-mail:qin

8、fenli@sina.com收稿日期：2009-08-04张桂花等：常规液相色谱柱测定早熟素Ⅱ的方法探讨1915实验，结果表明，流动相V(甲醇)∶V(水)=80∶20100y=1.0548x+0.135790时早熟素Ⅱ的保留时间为3.317min，峰形良好。在80此条件下，对含早熟素Ⅱ的供试样品进行分析表70明，早熟素Ⅱ与其他组分分离良好。因此，最终选6050定流动相为V(甲醇)∶V（