樱桃菌根真菌分离培养条件及有效性.doc

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1、樱桃菌根真菌分离培养条件及有效性摘要:采用PDA培养基、PDA-抗生索培养基以及MMN培养基,通过切片法从一年生樱桃(Prunuspseudocerasus)根中分离菌根真菌,用打孔法分离得到纯化菌株,并对菌株的生理生化特征进行系统鉴定。结果表明,切片分离时的表面消毒条件和方法以及分离培养基的选用均直接影响菌根真菌的分离纯化结果及菌根真菌的多样性。该菌利用HgCl处理6min,接种在改良MMN培养基中分离效果最好,该菌的最适pH7,最适温度为25°C,最适P浓度KH2P04和K2HP04分别为0.50g/L和1.00g/L,最适C源为可溶性淀粉,最适N源为尿素。将该菌加入到生

2、长基质屮能将炼苗期的樱桃苗的成活率由73%提高到86%O关键词:樱桃(Prunuspseudocerasus);菌根真菌;分离;培养条件;有效性中图分类号:0939.96文献标识码:A文章编号:0439-8114(2014)17-4025-04CultureConditionsandValidityofIsolatedCherry(Prunuspseudocerasus)MycorrhizalFungiLTUHui,WANGZhi-li,XUYing-ying,YANGShou-jun(PolytechnicInstitute,ChinaAgriculturalUnivers

3、ity(Yantai),Yantai264670,Shandong,China)Abstract:Theprocessofisolatingmicorrhizalfungifromcherryrootbysectioningwasevaluatedandtheisolatedfungiwereidentified.TheisolatedfungiwerecultivatedinthePDAmediuiibPDA-antibioticmediumandMMNmediumandsubsequenllypurifiedbypunchmethod.Theresultsshowedth

4、atdisinfectionconditionsandmethodsofslicesurfaceandmediumselectionaffecteddirectlythepurificationanddiversityofthefungiisolated.ThebestisolationwasonthemodifiedMMNmediumasisolatedfungiweresterilizedbyIlgClfor6minutes.Theisolatedfungicouldbettergrowthat25°C,pH7.0,KH2P040.50g/LandK2HP041.00g/

5、L.Solublestarchandureawerethebestsourcesofcarbonandnitride.Survivalrateofcherryseedlingsincreasedfrom73%to86%afteraddingtheisolatedfungiintosubstrate・Keywords:cherry(Prunuspseudocerasus);mycorrhizalfungi;isolation;cultureconditions;validity菌根(AM)是真菌菌丝与植物的根部紧密结合形成的一种特殊结构,与植物形成菌根的真菌称为菌根真菌[1-3

6、]o在菌根共生体中,大量延伸到土壤中的根外菌丝扩大了根系的吸收面积,并可通过菌丝从土壤中吸收水分和矿质营养元索(尤其是P和N)传递给植物;另一方面,菌根真菌可以通过根内菌丝从宿主植物体内获得具生长繁殖所需的碳水化合物和一些生长物质,从而形成一种营养上的互利共生关系[4,5]。研究发现,樱桃(Prunuspseudocerasus)根系的侵染率为56.11%[6],但目前国内对樱桃菌根共生体系建立方面的研究较少。本研究从一年生的樱桃根系中分离菌根真菌,并对该菌进行培养鉴定,最后将该菌与炼苗期的樱桃建立共生体系,为今后相关菌剂的生产和共生体系的建立奠定基础。1材料与方法1.1材料

7、1.1.1供试植株试验材料为一年牛的樱桃幼苗和组培樱桃苗,分别由中国农业大学烟台校区试验基地及组培实验室提供。苗木均为长势良好、均匀一致的植株。1.1.2分离培养菌根真菌所用的培养棊1)PDA培养基:马铃薯200g,葡萄糖15g,蛋白月东4g,KH2P040.5g,K2HP041g,无水CaC120.02g,ZnS040.0027g,FeS040.027g,MgSO4?7II2O0.15g,琼脂20g,去离子水1000mLo2)PDA-抗生素培养基[7]:马铃薯200g,葡萄糖15g,蛋白10g,KII

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