大兴安岭野生蓝莓菌根真菌分离及定殖分析

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3、码：１０２２５学号：Ｓ１５４２６学化冷文大兴安龄野生蓝養菌根真菌分离及定殖分析赵３＾宇指导教师姓名一；杨洪副教授东北林业大学申请学位级别：硕±学科专业：微生物学论文提交日期；２０１日年４月论文答辩日期：２０巧年６月授予学位单位：东北林业大学授予学位日期：２０巧年６月答辩委员会主席：王立群论文评阅人；许修宏文景芝、抑４欠學束３１？ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｄｅ：１０２２５ＲｅｇｉｓｔｅｒＣｏｄｅ：Ｓ１５４２６Ｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏ打ｆｏｒ化ｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓ

4、ｔｅｒＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｍｃｏｒｒｚｏｚａｌｆｉｍｉｏｆｗｉｌｄｂｌｕｅｂｅｒｒｉｅｓｆｒｏｍＧｒｅａｔｅｒｙｇＫｈｉｎａｎＭｏｕｎｔａｉｎｓｇＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＺｈａｏＸｉｎｕｇｙＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：ＹａｎＨｏｎｉｐｇｇｙＡｓｓｏｃｉａｔｅＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：ｐＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｒｅｅｉｇＡｐｐｌｉｅｄｆｏｒ：ＭａｓｔｅｒｏｆＳｃｅｎｃｅＳｐｅｃｉａｌｉｔｙ：ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＤａｔ：ｅｏｆＯｒａｌ

5、Ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ：Ｊｕｎｅ２０１５，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；ＮｏｒｔｈｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｔ摘要摘要与自然界中绝大多数植物相似，蓝璋的根系中也存在着菌根真菌共生，送类菌根属杜酷花类菌根（Ｅｒｉｃｏｉｄｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌ，ＥＲＭ）。茵根对藍替植株的营养吸收、抗病性、抗逆性有很大的改善作用，其生物学促生功能极为重要。本研究对大兴安岭地区野生蓝眷菌根真菌进行了分离、鉴定，并利用原位ＰＣ民技术分析茵根真苗在蓝璋植株根系的定殖情况。通过对大兴安岭地区野生蓝菩菌根真菌主要类群及其定殖情况

6、的Ｔ解，可Ｗ为优良菌剂的开发应用奠定基础，促进大兴安岭地区野生蓝奪引种栽培及繁育，同时也对菌根技术在农业生产上的应用具有重要的意义。结果如下：一（１）Ｗ大兴安岭野生蓝葛须根为实验材料，利用马下孟加拉红（ＭＡ）培养基、ＭＭＮ培养基分离了１３９株真菌，经茵落形态结合分子生物学方法鉴定后分类结果如下：Ｏｉｄｉｏｄｅｎｄｒｏｎ、Ｃｒｙｐｙｏｓｐｏｒｉｏｐｓｉｓ、Ｐｈｉａｌｏｃｅｐｈａｔｅ、Ｌａｃｈｍｔｍ、Ｙｃｎｒｏｗｉａｌｉｐｏｌｙｔ比。、Ｃｈａｅｋｍｉｕｍｉｏｂｏｓｕｍ、Ｓｏｒｄｃｔｒｉｏｍｃｅｔｅｓｓ．、Ｍｕｃｏｒｏｍｃｏｔ

7、ｉｍｓ．。ｇｙｐｙｐ口）Ｗ质粒ｐＣＡＭＢＩＡ１３００为骨架，将质粒ｐＣＴ７４上的增强型畑Ｐ表达盒克隆到该质粒的多克隆位点区（ｍｕｌｔｉｐｌｅｃｌｏｎｉｎｇｓｉｔｅ，ＭＣＳ），将质粒ｐＣＴ７４上的真菌潮霉素抗性基因（ｈｙｒｏｍｃｉｎｒｅｓｉｓｉｔａｎｔｅｎｅＨＹＧＣＡＭＢＩＡＤＯＯ原有的ｇｙｇ，）表达盒克隆替换ｐＨＹＧ表法念－，成功构建了表达载体ｐＸＢ杞ＥＨＧＦＰ。３ｔｕｍ－ｔ（）利用根癌农杆菌介导法ａｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｅｆａｃｉｅｎｓｍｅ山ａｅｄｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ，（ｇＡＴＭＴ）成功使ＧＦＰ

8、基因在两种盛巷内生真菌ｓｐ．的菌丝体内表达，通过巧光显微镜成功观察到了焚光菌丝形态，转化子