微生物的实验室培养.doc

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1、微生物的实验室培养教材内容解读要点1培养基培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。1•培养基的类型和用途（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基。其屮I古I体培养基川于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等，液体培养基常用于发酵工业。液体培养基：表面生长均匀混浊生长固体培养基：菌落，菌苔沉淀生长（2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。选择培养基:从微生物群屮选择具有特定表型的细胞.使之进行繁殖所用的培养基，称为选择培养基.加入青霉索的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基：分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基：

2、分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。合成培养基：根据细胞生存所需物质的种类和数景，用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生索、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低微生物的实验室培养教材内容解读要点1培养基培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。1•培养基的类型和用途（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基。其屮I古I体培养基川于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等，液体培养基常用于发酵工业。液体培养基：表面生

3、长均匀混浊生长固体培养基：菌落，菌苔沉淀生长（2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。选择培养基:从微生物群屮选择具有特定表型的细胞.使之进行繁殖所用的培养基，称为选择培养基.加入青霉索的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基：分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。合成培养基：根据细胞生存所需物质的种类和数景，用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生索、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低缺点

4、：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。天然培养基：天然培养基有血清、血浆、和组织提収液（如鸡胚和牛胚浸液）。优点：营养成分丰富，培养效果好缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染；人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。血清屮含有：%1多种蛋白质（H蛋白、球蛋片、铁蛋白等）%1多种金属离子；%1激索；%1促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。%1各种生长因子%1转移蛋白%1不明成分2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方3.不管哪种培养基，一般都

5、含有水、碳源、和氮源、无机盐、等营养物质，碳源：能为微生物的代谢提供碳元索的物质。如CE、NQHCO3等无机碳源；糖类、蛋片质、脂肪等有机碳源。异养微生物只能利川有机碳源。单质碳不能作为碳源。氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如辱NH?、M3、NH4蛋白质、氨基酸等。只有固氮微生物才能利用N2o另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质，例如：生长因子（即细菌生长必需，而白身不能合成的化合物，如维生索、某些氨基酸、喋吟、唏噪）以及氧气等的要求。要点2无菌技术无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。无论是随肩将要学到的倒平板、平板划

6、线操作，还是稀释涂布平板法，其操作屮的每一步都需要做到“无菌”,即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。（1）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下儿个方面：%1对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。%1将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基筹器具进行灭菌。%1为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。%1实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。（2）消毒与灭菌的区别消毒指使川较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽泡和泡子

7、）。消毒方法常用煮沸消毒法，还有化学药剂（如洒精、氯气、石炭酸等）消毒、红外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因索杀死物体内外所有的微生物，包括芽葩和葩子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。1•无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答：无菌技术还能有效避免操作者白身被微生物感染。2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养1U1（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。要点3制作牛肉膏蛋白月东固体培养基（1

8、）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。（2）倒