不同含油量甘蓝型油菜种子全蛋白及油体蛋白的双向电泳分析.pdf

《不同含油量甘蓝型油菜种子全蛋白及油体蛋白的双向电泳分析.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTwo—dimensionalelectrophoresisanalysisofthetotalproteinsandoilbodyproteinsintheBrassicanapusseeddifferingintheoilcontentByYuqinLiSupervisor：Prof．DongzhiYangProf．XinZangCellbiologyDepartmentofBiologicalEngineeringMav201

2、2学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：锄辱日期：细肜年少月弓／日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有

3、关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：孝孑殍日期：矽眵年厂月；f日摘要种子含油量作为生物学性状指标，是油菜的主要经济学价值，油脂常以三酰甘油的形式储存在油体中。提高含油量对我国油料作物供不应求的形势有重要意义。目前对含油量形成的分子机理了解的仍然较少。蛋白质组学是研究种子含油量性状的有效技术。本文首先建立了适合油体观察的体系，并且分析了高、低含油量油菜种子油体形态特征。同时建立了适合甘蓝型油菜

4、种子全蛋白的双向电泳方法。然后利用已建立的油菜种子全蛋白双向电泳的方法对高、低含油量甘蓝型油菜种子的油体蛋白进行双向电泳。并进一步利用软件分别分析了高、低含油量甘蓝型油菜种子蛋白质的差异和高、低含油量种子中的油体蛋白的差异，为揭示高含油量形成的分子机理提供了理论基础，具有一定的意义。主要实验结果如下：(1)建立了油体的观察方法。采用石蜡切片方法以及尼罗红染色和荧光显微镜观察是对甘蓝型油菜油体形态进行分析研究可行的方法。使用重铬酸钾固定液处理后的种子制作的石蜡切片可以得到细胞形态更加完整的切片。(2)利用荧光显微技术对油菜种子中的油体进行细胞、组织学观察。首先在普通光源下对

5、油体切片进行观察发现：高含油量油菜种子切片中细胞的内含物排列紧密没有空隙，表明高油中储藏物质较丰富；低含油量油菜种子切片中细胞细胞的内含物较少，零星得分布在细胞中。汞灯光源下对油体切片进行观察发现：高含油量油菜种子切片细胞中的油体数量较多，油体经尼罗红着色后经绿光激发后发出红色荧光，明亮清晰；而低含油量油菜种子中油体较少，发出的红色荧光较暗，整体切片荧光亮度较弱。经显微形态计量分析，高、低含油量油菜种子的单位面积上的平均光密度值差异有统计学意义，因此本实验方法可以作为比较油菜含油量高低的一种鉴别方法。(3)建立和优化了基于管状胶的双向电泳体系。对不同含油量的甘蓝型油菜种子

6、全蛋白进行了双向电泳的分离，获得了两者的蛋白表达图谱，经PDQuest8．01软件分析，高、低含油量种子全蛋白的差异表达蛋白的有12个。(4)建立和优化了适合油菜种子中油体蛋白的提取方法，利用此方法分别得到了高、低含油量甘蓝型油菜种子中的油体蛋白。利用上述建立的油菜种子摘要全蛋白的双向电泳的方法对油体蛋白进行了双向电泳的分离，获得了两者的蛋白表达图谱，经PDQuest8．01软件分析，高、低含油量种子油体蛋白的差异表达蛋白的有16个。关键词：油体荧光显微观察双向电泳全蛋白油体蛋白ⅡAbstractAbstractTheseed’Soilcontentasabiologic

7、altraitindicator,ISthemareeconomicsvalueoftherape．1ipidoftenstoreintheoilbodyintheformofTAG．Enhancingtheoilcontentinresponsetothesituationofourcountryfsoilcropsinshortsupplyisofgreatsignificance．Themolecularmechanismoftheformingofoilcontentisstillinsufficientunderst