大豆应答玉米小斑病菌胁迫的蛋白质双向电泳分析-论文.pdf

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1、分子植物育种，2013年，第11卷，第5期，第476～485页MolecularPlantBreeding，2013，Vo1．11，No．5，476～485研究论文ResearchArticle大豆应答玉米小斑病菌胁迫的蛋白质双向电泳分析董玉梅1何霞红1苏源2李成云肖秋芸赵正龙，朱有勇1云南农业大学，农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室，昆明，650201；2昆明学院生命科学与技术系，昆明学院，昆明，650214；3云南农业大学植物保护学院，昆明，650201通讯作者yyzhu@ynau．edu．cn摘要

2、为探究大豆应答非致病菌(Bip0larismaydis)胁迫的分子机制，将玉米小斑病菌接种于3周龄的大豆苗。取48hpi的大豆叶片以TCA／丙酮法提取蛋白质，利用蛋白质双向电泳技术分离蛋白，串联质谱(MS+MS／MS)鉴定蛋白质再结合生物信息学技术进行蛋白质功能分析。结果显示：分离到大豆苗期叶片总蛋白点1300+15个，其中，差异表达(2倍以上，P值<0．o5)的蛋白质点18个，除2个蛋白点未成功测序，其余16个差异蛋白点经GO分析可知，差异表达的蛋白质功能主要涉及光合作用、胁迫应激和非寄主抗性响应，如核酮糖1

3、，5一二磷酸羧化酶、病程相关蛋白PR-10和细胞骨架结构相关蛋白profilin一2。同时，由测序结果推测：在非致病菌f玉米小斑病菌)的胁迫下，大豆通过降低光合作用相关蛋白和能量代谢相关蛋白的表达，来增强防御相关蛋白和非寄主抗性相关蛋白的表达。关键词大豆，应答，玉米小斑病菌，胁迫，双向电泳ProteomicAnalysisofGinemaxLeafinResponsetoStressofBipolaris1●maycttsDongYumeiHeXiahongSuYuanLiChengytmXiaoQiuyunZ

4、haoZhenglongZhuYouyong1KeyLaboratoryofAgro—BiodiversityandPestManagementofEducationMinistryofChina，YunnanAgnculturalUniversity，Kunming，650201；2TheLifeScienceandTechnologyDepartmentofKunmingUniversity,Kunming，650214；3CollegeofPlantProtection，YunnanAgncultural

5、University，Kunming，650201Correspondingauthor，yyzhu@ynau．edu．cnDOI：10．3969／mpb．011．000476AbstractToinvestigatetheresponseoftheGlycinemntonon—adaptedfungistress．3-week-oldsoybcanseed—lingsweresubjectedtoBipolarismaydisstress．Leaftissueswereharvested48hpostinoc

6、ulatedandTCA—acetoneprecipitationmethodwasusedforproteinextraction．Atandemcombinationoftwo—dimensionalelectrophoresis，massspectrometry(MS+MS／MS)，andbioinformaticstoolswereusedtoidentifyproteinthatcontributetonon-hostresistanceinClycinemay,．Resultsshowedalmos

7、t1300proteinspotswereseparatedwith2-DEgelsofleafofGlycinemax．Eighteendifferentiallyproteins(Iratiol>2，p<0．05)wereidentifiedininoculatedcomparedtocontro—llingplants，includingproteinsinvolvedinphotosynthesis，responsetostress，andnon—hostresistantresponsesuchasR

8、uBisCO，pathogenrelatedproteinPI10，andcytoskeletonstructurerelatedproteinprofilin一2．Takentogether，whenGlycinemax,wassubjectedtothenon-adaptedpathogenBipolarismaydis，itexpressednon-hostresistanceH