QX型鸡传染性支气管炎弱毒疫苗的研制.pdf

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1、QX型鸡传染性支气管炎弱毒疫苗的研制DevelopmentofanattenuatedlivevaccineforQX—·typeavianinfectiousbronchitis研究生：陈启稳专业：预防兽医学导师：吴艳涛教授张小荣副教授扬州大学兽医学院2014年6月陈启稳QX型鸡传染性支气管炎弱毒疫苗的研制QX型鸡传染性支气管炎弱毒疫苗的研制研究生：陈启稳导师：吴艳涛教授张小荣副教授摘要鸡传染性支气管炎(infectiousbronchitis，IB)是一种由传染性支气管炎病毒(infectiousbronch

2、itisvirus，IBV)引起的急性、高度接触性传染病。IBV血清型众多，不同血清型毒株之间的交叉免疫保护作用不好。研究表明，IBV的血清分型和基因分型具有一致性。由于Mass型疫苗在我国已经广泛使用多年，与目前主要流行的QX型毒株遗传关系较远，在实际生产中免疫保护效果并不理想。因此，研制QX型弱毒疫苗对于预防和控制我国IB的发生和流行具有重要意义。1．QX型鸡传染性支气管炎病毒QXL株的鉴定对QX型IBVQXL毒株的生物学特性进行了研究。纯净性研究表明，毒株无细菌、支原体及其他外源病毒污染。致病性研究表明，Q

3、XL毒株能够引起15日龄的SPF雏鸡100％发病，40％死亡；剖检病死鸡，可见气管及支气管的管腔中有大量炎性或干酪样渗出物；肾脏肿大，输尿管中有大量尿酸盐沉积、外观呈大理石纹状；组织病理学及免疫组织化学检查发现，毒株对气管及肾脏的损伤较为严重。此外，QXL毒株对雏母鸡的输卵管及卵巢也具有较强的致病力；与健康对照组相比攻毒组鸡的产蛋量下降50％左右；攻毒后180d，剖检发现有近27％鸡有严重的腹膜炎，36％鸡有卵巢炎症，卵巢发育不良，卵子变性坏死，呈红褐色。组织病理学研究发现，攻毒组鸡卵巢组织中有大量的异噬性粒细胞

4、浸润，卵子坏死脱落；免疫组织化学研究发现，在输卵管和卵巢组织中均可以广泛的检测到病毒抗原。2．QX型鸡传染性支气管炎病毒QXL株的致弱QXL毒株经SPF鸡胚连续传代，随着传代次数的增加，毒株对鸡胚的适应性越来越好。为了评价QXL毒株在连续传代后其致病力的变化，本研究选择不同代次毒株接种1～3日龄的SPF雏鸡，观察其发病及死亡情况，并进行组织病理学检查。结果表明，10--一30代毒株能够引起80％以上雏鸡发病，20％以上雏鸡死亡；50代毒株的致病力显著降低，仅导致20％的雏鸡发病；接种70代及之后各代次毒株的鸡，无

5、发病或死亡，各组织器官均也无异常。扬州大学硕士学位论文对QXL第70、80、85、87、90、100、110、120代毒株免疫原性的研究。结果表明，以上各代次免疫组鸡，在受到同源强毒攻击时，均可提供90％以上保护。因此，70代及之后各代次毒株致病力充分降低的同时，仍然保留有良好的免疫原性。我们选取第87代毒株为进一步研究的对象，命名为QXL87株。对QXL不同代次毒株Sl基因序列的分析，结果表明，在第5代到第120代的传代过程中，仅有4个核苷酸位点发生突变，并仅导致相应的2个氨基酸残基发生改变。由此推测，IBVQ

6、XL毒株致病力和免疫原性的改变可能还与其他一些基因的变化有关。3．QX型鸡传染性支气管炎病毒QXL87株弱毒疫苗的I临床前研究QXL87株鸡体内分布及排毒规律研究，结果表明，接种后第5d及第7d各脏器均能分离到病毒，而接种后的第15d各脏器均未分离到病毒。毒力反强试验研究表明，QXL87株经SPF鸡连传5代，没有出现毒力返强现象。研究表明，QXL87株对雏母鸡的输卵管及卵巢已无致病力。综上所述，QXL87株是理想的Qx型IB弱毒疫苗候选毒株。关键词：鸡传染性支气管炎病毒；QX型；弱毒疫苗陈启稳QX型鸡传染性支气管

7、炎弱毒疫苗的研制DevelopmentofanattenuatedlivevaccineforQX-·typeavianinfectiousbronchitisM．S．candidate：QiwenChenAdvisor：Prof．YantaoWu，AssociateProf．XiaorongZhangAbstract3Infectiousbronchitis(IB)isanacute，highlycontagiousdiseaseofchickenscausedbyinfectiousbronchitisvir

8、us(IBV)．IBVhavemanyserotypes，buthavelittleornocrossprotectionOccursbetweendifferentserotypesofIBV．TheMass-typevaccinehasbeenwidelyusedformanyyearsinOurcountry,anditisgeneticallydifferentf