【实验】固定化乳糖酶的制备.ppt

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1、课题3酵母细胞的固定化清溪中学陈华毅一、酶的应用：优点：催化效率高、低耗能、低污染缺点：1、对环境条件敏感、易失活；2、难回收、不能再次利用、成本高：3、反应后，酶混在产物中，影响产品质量如何解决？课题背景固定化酶：将分离提纯后的酶固定到一定的载体上，使用时将被固定的酶投放到反应溶液中，催化反应结束后，又能将被固定的酶回收，这样的酶叫做固定化酶。固定化酶固定化技术酶不溶于水的载体原理基础知识1.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例（1）需要酶葡萄糖异构酶（2）葡萄糖异构酶的优点稳定性好、可以持续发挥作用

2、（3）在生产中直接使用酶有什么缺点？酶溶解于葡萄糖溶液后，无法回收，造成浪费固定化酶的反应柱示意图葡萄糖反应柱果糖上端注入下端流出生产过程：3.固定化酶在生产实践中的优点（1）反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本.（2）提高了果糖的产量和质量。（二）固定化细胞技术1.将酶或细胞固定化的方法将酶（或细胞）包埋在细微网格里将酶（或细胞）相互连接起来将酶（或细胞）吸附在载体表面上包埋法化学结合法物理吸附法酶和细胞的固定方法和特点固定对象酶细胞适宜固定法化学结合法、物理吸附法包埋法特点体积小，包埋法容易丢

3、失。固定一种酶。体积大，难以化学结合和吸附固定一系列酶。2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别联系：应用相同，都能催化某些反应区别：（1）固定化细胞技术操作容易，成本低，容易回收；（2）固定化细胞技术对酶活性影响更小；（3）固定化细胞固定的一系列酶；（4）由于大分子难以通过细胞膜，因此固定化细胞的应用有一定的限制；3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等，其共同的特点是不溶于水的多孔性载体海藻酸钠聚丙烯酰胺发酵操作流程酵母细胞的活化配制CaCl2溶液配制海藻

4、酸钠溶液将海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合固定化酵母细胞冲洗凝胶珠酒精发酵（一）制备固定化酵母细胞实验操作利用固定化酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。细胞的固定化要在严格的无菌条件下进行；反复使用固定化酵母细胞时，需要避免微生物的污染。在应用固定化酵母细胞进行酒精发酵时要注意控制好温度，保证缺氧的环境，并且发酵时间要稍长一些，增强实验效果。三者优点和不足？类型优点不足直接使用酶固定化酶固定化细胞催化效率高，低耗能、低污染对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再

5、次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量。酶既能与反应物接触，又能与反应物分离，同时固定在载体上的酶还可以被反复利用。一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到。成本低，操作更容易固定后的细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降。