rlx微生物的实验室培养(精品).doc

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1、生物学案课题1微生物的实验室培养高二上学期编辑：高二生物组时间：2012-4-25【学习目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。【学习重点】无菌技术的操作【学习难点】无菌技术的操作【课前预习导学】一、基础知识（一）培养基1.培养基的种类包括培养基和培养基等。2.培养基的化学成分一般都含有类营养成分。3.在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基屮添加:培养细菌时需要将培养基的PH调至:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。（二）无菌技术1.获得纯净培养物的关键是。避免杂菌

2、污染的方法主要包括以下四个内容：①对实验操作的、操作者的衣着和手进行清洁和。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行.%1为避免周围环境屮微生物的污染，实验操作应在附近进行。%1实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。2.消毒和灭菌（1）消毒是指使用仅杀死物体表面或的部分微生物（不包括和）o常用的消毒方法有、用O此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如、等。此外，实验室里还用或进行消毒。（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体的微生物，包括芽抱和抱了。常用的灭菌方法有、、‘二、实验操作木实验用培养基讲行大肠杆菌的纯化培养，可分成和两个阶段进

3、行。1•制备牛肉膏蛋H腺固体培养基f—-*f倒平板2.纯化大肠杆菌微生物接种的方法屮最常用的是和o(1)平板划线法是指接种环在琼脂固体培养基表瓯的操作，将聚集的菌种到培养基的表面。(2)稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的,然后将不同的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度的菌液时，聚集在一起的微生物将被分散成,从而能在培养基表面形成单个的O三、结果分析与评价1・如果接种大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，说明接种符合要求。2.若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程屮未达到要求。3.的作为对照的培养基，在培养过程中出现了菌

4、落，则说明培养基不彻底，实验失败。四、菌种的保存1•对于频繁使用的菌种，我们可以采用法；2.对于需要长期保存的菌种，可以采用法。探究一：有关“倒平板”操作1•培养基火菌后，需要冷却到50°C左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的温度？2.为什么需要使锥形瓶的瓶II通过火焰?2.平板冷凝后，为什么要将平板倒置?2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在111L盖与1111底Z间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？探究二：有关“平板划线法”操作1.为什么在操作的第一步以及每次划线Z前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为

5、什么？2.在灼烧接种坏Z示，为什么要等其冷却后再进行划线?2.在作第二次以及其示的划线操作是为什么总是从上一次划线的末端开始划线?探究三：有关“稀释涂布平板法”操作1.系列稀释操作屮M注意的事项有哪些?2.涂布平板的所有操作都戒在火焰附近进行，结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，涂布平板操作的第2步应如何进行无菌操作？课堂习题1•下列措施屮不属于消毒的是（）A.酒精擦拭双手B.向水屮通入少量Cl2C.皮肤受伤处涂紫药水D.灼烧接种坏2.有关平板划线操作的叙述，正确的是（）A.使用己火菌的接种环、培养1111,操作过程小不再火菌A.打开含菌种的试管需

6、通过火焰灭菌，取出菌种麻需马上塞上棉塞B.把血盖打开，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可C.最示将平板倒置，放入培养箱屮培养2.下列有关平板划线接种法的操作错谋的是（）A.将接种环放在火焰上燃烧B.将已冷却的接种环伸入菌液屮蘸取一环菌液C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D.接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连3.关于制备牛肉膏蛋白腺固体培养基的叙述错误的是（）A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.等培养基冷却至50°C左右时进行倒平板D.将平板冷却凝固5-10分钟后将平板倒过来放置

7、4.细菌培养过程分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）A.接种环、手、培养基B.高压锅、手、接种环C.培养基、手、接种环D.接种环、手、高压锅5.有关稀释涂布平板法的叙述错课的是（）A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表更C.适宜条件下培养D.结果都可在培养基表血形成单个的菌落6.如右图是微工物T•板划线示意图。划线的顺序为1—2—3-*4-*5。下列操作方法正确的是（）A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧火菌R.划线操作须在火焰上进行C.在5区域屮才可以得到

8、所需菌落D.在1、2、3、4、5区域屮划线前后都要对