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时间:2019-10-19
《pET-22b()大肠杆菌表达载体说明.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、pET-22b(+)编号载体名称北京华越洋生物VECT5200pET‐22b(+)pet22b载体基本信息别名:pET22b, pet 22b, pET‐22b(+)质粒类型:大肠杆菌蛋白表达表达水平:高克隆方法:多克隆位点,限制性内切酶载体大小:5500bp5' 测序引物及序列:T7: 5'‐TAATACGACTCACTATAGGG‐3'3' 测序引物序列:T7t: 5'‐GCTAGTTATTGCTCAGCGG‐3'载体标签:N‐pelB; C‐His载体抗性:氨苄备注:pET22b载体含有PelB信号肽序列,能够将表达的目的蛋白定位在细胞外周质腔。
2、稳定性:瞬时表达Transient组成型:组成型Constitutive病毒/非病毒:非病毒pet22b载体质粒图谱和多克隆位点信息pet22b载体简介pET‐22b(+)载体携带有一个N端的pelB信号肽序列,能够将表达的目的蛋白定位于外周质腔,同时载体含有C端His标签。载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码
3、序列的病毒粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。pet22b载体序列ORIGIN1ATCCGGATATAGTTCCTCCTTTCAGCAAAAAACCCCTCAAGACCCGTTTAGAGGCCCCAA61GGGGTTATGCTAGTTATTGCTCAGCGGTGGCAGCAGCCAACTCAGCTTCCTTTCGGGCTT121TGTTAGCAGCCGGATCTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAGTGCGGCCGCAAGCTTGT181CGACGGAGCTCGAATTCGGATCCGAATT
4、AATTCCGATATCCATGGCCATCGCCGGCTGGG241CAGCGAGGAGCAGCAGACCAGCAGCAGCGGTCGGCAGCAGGTATTTCATATGTATATCTC301CTTCTTAAAGTTAAACAAAATTATTTCTAGAGGGGAATTGTTATCCGCTCACAATTCCCC361TATAGTGAGTCGTATTAATTTCGCGGGATCGAGATCTCGATCCTCTACGCCGGACGCATC421GTGGCCGGCATCACCGGCGCCACAGGTGCGGTTGCTGGCGCCTATATCGCCGACA
5、TCACC481GATGGGGAAGATCGGGCTCGCCACTTCGGGCTCATGAGCGCTTGTTTCGGCGTGGGTATG541GTGGCAGGCCCCGTGGCCGGGGGACTGTTGGGCGCCATCTCCTTGCATGCACCATTCCTT601GCGGCGGCGGTGCTCAACGGCCTCAACCTACTACTGGGCTGCTTCCTAATGCAGGAGTCG661CATAAGGGAGAGCGTCGAGATCCCGGACACCATCGAATGGCGCAAAACCTTTCGCGGTAT721GGCATGATAGCGCCCGGAA
6、GAGAGTCAATTCAGGGTGGTGAATGTGAAACCAGTAACGTT781ATACGATGTCGCAGAGTATGCCGGTGTCTCTTATCAGACCGTTTCCCGCGTGGTGAACCA841GGCCAGCCACGTTTCTGCGAAAACGCGGGAAAAAGTGGAAGCGGCGATGGCGGAGCTGAA901TTACATTCCCAACCGCGTGGCACAACAACTGGCGGGCAAACAGTCGTTGCTGATTGGCGT961TGCCACCTCCAGTCTGGCCCTGCACGCGCCGTCGCAAATTGTCGCG
7、GCGATTAAATCTCG1021CGCCGATCAACTGGGTGCCAGCGTGGTGGTGTCGATGGTAGAACGAAGCGGCGTCGAAGC1081CTGTAAAGCGGCGGTGCACAATCTTCTCGCGCAACGCGTCAGTGGGCTGATCATTAACTA1141TCCGCTGGATGACCAGGATGCCATTGCTGTGGAAGCTGCCTGCACTAATGTTCCGGCGTT1201ATTTCTTGATGTCTCTGACCAGACACCCATCAACAGTATTATTTTCTCCCATGAAGACGG1261TACGC
8、GACTGGGCGTGGAGCATCTGGTCGCATTGGGTCACCAGCAAATCGCG
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