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《GBT5413.17-1997婴幼儿配方食品和乳粉泛酸的测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、GB/T5413-17-1997前言木标准给出两种方法，方法一是微生物法.为等效采用美国公职分析化学师协会(AOAC)的方法，虽然操作步骤萦杂，但测定结果准确度高.方法二是高压液相色谱法，是经实验确定的一种快速、准确的方法。木标准方法一为仲裁法。木系A标准从实施之日起，代替GB5413-85.木标准由中国轻工总会提出。木标准由全国乳品标准化中心归口。木标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。木标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀粱(中国)投资服务有限
2、公司。木标准主要起草人:张玉杰、工芸、殷晓红、杨金宝、吕为群。中华人民共和国国家标准婴幼儿配方食品和乳粉GB/T5413.17-1997泛酸的测定代替GB5413-85MilkpovMerandformulafoodsforinfantandyoungchildrenDeterminationofpantothenicacid范围木标准规定了用微生物法和高压液相色谱法测定泛酸的方法。木标准方法一适用于婴幼儿配方食品和乳粉中泛酸的测定，方法二适用于乳粉中泛酸的测定。方法一微生物法2方法原理利用植物乳杆菌(Lac
3、tobaciliusplantarum)的繁Via与样品中的泛酸含址成正比的关系可计算出样品中的泛敌含a..3试剂、菌种和培养基所有试剂，如末注明规格，均指分析纯，所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。3.1生理盐水:她氯化钠溶于100O.L容址瓶中。东2泛酸钙:标准品。3.3乙酸:c(HAc)为0.2..i/L.吸12mL冰乙酸用燕馏水稀释至IL.3.4甲苯。3.5乙酸钠:c(N&Ac)为0.2m0i/L.溶解16.4g无水乙酸钠于水中，稀释至100O.L.&6菌种—植物乳杆菌(UdubaciUnsp
4、lanta、二).忍7培养基&7.1乳酸杆菌琼脂培养基:光解陈15g,醉母浸青59,葡萄械log,番茄汁100mL.磷酸二氧钾29,聚[h梨糖单A酸酷18，琼脂I飞，加燕馏水至1000mL,pH6.8士0.2(251C).&7.2乳酸杆菌肉汤培养基:光解陈I宛.解母浸青宛，荀萄翻.飞，番茄汁100.1.,磷酸二氧钾飞，聚山梨糖单油fifliIll,加燕馏水至1000,nL,pH6.8土0.2(25C).忍7.3泛酸测定用培养墓:荀萄械4飞，乙敌钠2飞，无维生素酸水解酪蛋白I飞，磷酸牡二钾Il,磷酸二氧钾19,
5、L-KU酸0.49,L一色氨酸0.lg,%酸镁0.4g,氮化钠20.g,硫酸qp.铁20.g,硫酸锰20.g,硫酸腺嗓岭20.g,盐酸鸟嗦吟20mg,尿喃咤20.g，胡萝卜索400pg,盐酸硫胺素20Q,g，生物素0.8pg,p-氨基苯甲酸200pg,烟酸lmg,盐酸毗哆醉800}g,聚山梨抽单油酸M0.Ig,加燕馏水至1000,nL,PH6.7士0.1(25r).国家技术监普局1997-05-28批准1998-09-01实施GB/T541117-19974仪器常用实验室仪器及分光光度计。5制备5.1菌种的制
6、备5.1.1将保存在直柱状thl体培养基中的植物乳杆菌接种到新的乳酸杆菌琼脂培养基中，培养后再继代培养一次，然后将其转接到乳酸杆菌肉汤培养基中培养后备用。5.1.2将5.1.1中的菌怂液以20OOr/min离心2-3min,倾出上济液，加入】O.L生理盐水(3.1),搅匀，再离心2-3min,如此清洗3次.吸1.OmL该菌悬液于I(hnL生理盐水(3.1)中。5.1.3用721型分光光度计，于550nm波长下.以生理盐水(3.1)做对照，侧5.1.2菌悬液的浊度值，此值应在60%-80%之间。52标准滚液的制
7、备5.2.1泛酸标准贮备液:浓度4印9加L.精确称取45-55.g泛酸钙标准品(3.2),溶入500mL燕馏水中，加lomL乙酸(3.3)，加IOomL乙酸钠(3.5)洲水稀释至泛酸钙精确浓度为43.47pg/mL(即泛酸浓度为4C},g/mL)，加甲笨(3.4)t'.于冰栩中。5.2.2泛酸中间贮备液:浓度Igg腼L.取25mL标准贮备液(5.2.1),加入大约500ML燕馏水，乙酸IOmL(3.3)，乙酸钠IOOmL(3.5),再用水稀释至IL.加甲笨(3.4)r-于冰箱中。5.2.3泛酸标准工作液:高浓
8、度的为lOng/mL,低浓度的为5.g/mL.吸5.OmL中间贮备液(5.2.2),用燕馏水稀至500,OmL.侮次测定前制备。吸5.O}L中间贮备液(5.2.2),用燕馏水稀至1000mL.每次测定前制备。6测定6.1样品的处理称取一定量的样品，加入IOML缓冲液(称24.2gTri}B".溶入200mL水中即可)，再加足量的水，121℃水解15min,冷却，调PH至‘5.然后定容到250.L，过
