琐琐葡萄多糖对大鼠体外免疫性肝损伤保护作用探究

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1、琐琐葡萄多糖对大鼠体外免疫性肝损伤保护作用探究作者:刘涛马龙赵军苏德奇【摘要】目的研究琐琐葡萄多糖(VVP)在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法采用热水提取、乙醇沉淀,Sevage法除蛋白、透析分离纯化提取WP,苯酚硫酸法测定多糖含量。采用BCG整体致敏,LPS离体攻击法建立大鼠原代肝细胞免疫损伤模型取细胞上清液测定其ALTAST5,20,80pg/ml均可程度不同地使BCG+LPS损伤后升高的大鼠肝细胞上清ALT,AST活性和NO含量明显下降,其活性和NO含量。结果琐琐葡萄中多糖含量为8.19%;VVP作用与阳性对照药物甘立欣(Grz)相似。

2、结论VVP在体外对大鼠免疫性肝损伤具有明显的保护作用。【关键词】琐琐葡萄;多糖;肝细胞;免疫性肝损伤Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofpolysaccharideisolatedformVitisviniferalonimmunologicalliverinjurymodelinvitro.MethodsVitisamurensisPolysaccharidewasobtainedbyextractingwithwater,precipitationwith95%ethanol,clearingproteinw

3、iththesevageassay,anddialyzingandphenol・sulphatecolorimetrywasusedtodetermineitscontent.TheimmunologicalhepatotoxicitymodelwasinducedbyBacillusCalmetteGuerin(BCG)pluslipopolysaccharides(LPS)invitro.Thesupernatantofcellsafter3~24hincubationwithVVPweretakenfortheestimationofALT,

4、ASTandNOrespectively.ResultsThecontentofpolysaccharideinVitisamurensiswas8.19%・ElevatedALT,ASTactivitiesandNOlevelweredecreasedaftertreatmentwithVVP(520,80pg/ml)indifferentdoses.TheeffectsofVVPmentionedaboveweresimilartothoseofthestandarddrug,DinmmoniumGlycyrrhizinate(Grz).Con

5、clusionVitisviniferalpolysaccharideshowssignificantprotectiveeffectsagainstimmunologicalliverdamageinducedbyBCGplusLPSinvitro.Keywords:vitisviniferal;Polysaccharide;Hepatocyte;Immunologicalliverinjury琐琐葡萄为葡萄科葡萄属植物琐琐葡萄VitisviniferalL•的成熟果实,主产于新疆吐鲁番、和田、都善等地,是维吾尔医习用的一种药食兼用植物,药用果实

6、,具有健脾胃、理肺、生津、养血等作用。维医用于治疗脾胃不和、神志不安等,民间用于小儿麻疹、肝炎等症[1]o琐琐葡萄中除含有大量的葡萄糖、果糖、维生素、氨基酸等营养成分外,还有隸质类、黄酮、菇类、多糖等多种生物活性物质[2~4]o研究表明多糖(polysaccharides)具有增强免疫、抗氧化、抗肿瘤、降血脂、抗衰老、抗辐射等多方面的药理作用[5],是近年来天然药物研究的热点课题之一。为探讨多糖与琐琐葡萄抗病毒免疫调节活性的相互关系,本研究采用热水提取、乙醇沉淀,Sevage法除蛋白、透析分离纯化提取了琐琐葡萄多糖(WP),苯酚硫酸法测定多糖含量,

7、并采用BCG整体致敏,LPS离体攻击法建立大鼠原代肝细胞免疫损伤模型,探讨了WP在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用。1器材1.1动物SD大鼠,雄性,体重(200±20)g,新疆医科大学实验动物中心提供(SPF级,动物使用许可证号:SYXK[新]2003-0001)b1.2药材琐琐葡萄购自新疆维吾尔自治区吐鲁番维药市场,经专家鉴定为VitisviniferalL的果实。1.3仪器与试剂UV2501PC型双光束紫外分光光度计(日本岛津);SaBa18AMS全自动生化分析仪(Roma-Italy);Forma二氧化碳培养箱;XD7"型酶标仪(上海迅达医疗

8、器械有限公司);DZK88-A型电热恒温真空干燥箱(上海医疗器械七厂);CQ-50型超声波清洗器(上海超声波仪器厂)MET

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