琐琐葡萄多糖对大鼠体外免疫性肝损伤保护作用的研究

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1、琐琐葡萄多糖对大鼠体外免疫性肝损伤保护作用的研究作者：刘涛马龙赵军苏德奇【摘要】目的研究琐琐葡萄多糖在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法采用热水提取、乙醇沉淀，Sevage法除蛋白、透析分离纯化提取VVP，苯酚硫酸法测定多糖含量。采用BCG整体致敏，LPS离体攻击法建立大鼠原代肝细胞免疫损伤模型，取细胞上清液测定其ALT，AST活性和NO含量。结果琐琐葡萄中多糖含量为％；VVP，20，80μg/ml均可程度不同地使BCG+LPS损伤后升高的大鼠肝细胞上清ALT，AST活性和NO含量明显下降，其作用与阳性对照药物甘立欣相似。结论VVP在体外对大鼠免疫性肝损伤具有明显的保护作用

2、。【关键词】琐琐葡萄；多糖；肝细胞；免疫性肝损伤Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofpolysaccharideisolatedformVitisviniferalonimmunologicalliverinjurymodelinamurensisPolysaccharidewasobtainedbyextractingwithwater,precipitationwith5%ethanol,clearingprotEinwiththesevageassay,anddialyzingandphenol-sulphatecolorimetryw

3、asusedtodetermineitscontent.TheimmunologicalhepatotoxicitymodelwasinducedbyBacillusCalmetteGuerin(BCG)pluslipopolysaccharides(LPS)invitro.Thesupernatantofcellsafter～2hincubationwithVVPweretakenfortheestimationofALT,ASTandNOrespectively.ResultsThecontentofpolysaccharideinVitisamurensis％.Eleva

4、tedALT,ASTactivitiesandNOlevelweredecreasedaftertreatmentwithVVP(5，20，80μg/ml)indifferentdoses.TheeffectsofVVPmentionedaboveweresimilartothoseofthestandarddrug,DinmmoniumGlycyrrhizinate(Grz).ConclusionVitisviniferalpolysaccharideshowssignificantprotectiveeffectsagainstimmunologicalliverdamag

5、einducedbyBCGplusLPSinvitro.Keywords：vitisviniferal;Polysaccharide;Hepatocyte;Immunologicalliverinjury琐琐葡萄为葡萄科葡萄属植物琐琐葡萄VitisviniferalL.的成熟果实，主产于新疆吐鲁番、和田、鄯善等地，是维吾尔医习用的一种药食兼用植物，药用果实，具有健脾胃、理肺、生津、养血等作用。维医用于治疗脾胃不和、神志不安等，民间用于小儿麻疹、肝炎等症［1］。琐琐葡萄中除含有大量的葡萄糖、果糖、维生素、氨基酸等营养成分外，还有鞣质类、黄酮、萜类、多糖等多种生物活性物质［2～4］

6、。研究表明多糖具有增强免疫、抗氧化、抗肿瘤、降血脂、抗衰老、抗辐射等多方面的药理作用［5］，是近年来天然药物研究的热点课题之一。为探讨多糖与琐琐葡萄抗病毒免疫调节活性的相互关系，本研究采用热水提取、乙醇沉淀，Sevage法除蛋白、透析分离纯化提取了琐琐葡萄多糖，苯酚硫酸法测定多糖含量，并采用BCG整体致敏，LPS离体攻击法建立大鼠原代肝细胞免疫损伤模型，探讨了VVP在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用。1器材动物SD大鼠，雄性，体重g，新疆医科大学实验动物中心提供。药材琐琐葡萄购自新疆维吾尔自治区吐鲁番维药市场，经专家鉴定为VitisviniferalL.的果实。仪器与试剂UV2

7、501PC型双光束紫外分光光度计；SaBa1AMS全自动生化分析仪；Forma二氧化碳培养箱；XD11型酶标仪；DZK88-A型电热恒温真空干燥箱(上海医疗器械七厂)；CQ-50型超声波清洗器(上海超声波仪器厂)；METTLERTOLEDOAB104-N型分析天平(Mettler-ToledoLtd)。甘立欣；Ⅳ型胶原酶、LPS；DMEM培养基；胎牛血清；卡介苗；谷草转氨酶、谷丙转氨酶试剂盒，N-萘基-乙烯二胺、对氨基苯磺酰胺。其余试剂均为国产分析纯。方法.1VVP的提取及含量测定琐琐葡萄药