宋彦峰课程论文

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1、农学院本科课程论文题目：ISSR技术及其在豆类作物研究屮的应用专业班级：农学0502班学号：2005014010201学生姓名：宋彦峰指导教师：刘立峰职称：研究员二零零八年十二月ISSR技术及其在豆类作物研究中的应用宋彦峰农学0502班2005014010201指导教师：刘立峰摘要：简单序列重复区间(Inte.Simplesequencerepeat,ISSR)是一种新型的分子标记。本文简耍介绍了ISSR技术原理及特点，对ISSR技术在豆类品种鉴定、纯度鉴定、遗传图谱构建、基因定位、亲缘关系及种

2、质资源遗传多样性中的应用现状进行了综述。关键词：ISSR；分子标记；豆类；遗传多样性ISSRtechnologyanditsapplicationinLegumeCropSONGYanfengAbstract：Inter-Simplesequencerepeatisanewkindofmolecularmarkers・ThispaperintroducestheprincipleandthecharacteristicsofISSRtechnologyinbriefandrepresentsth

3、eidentificationofvarieties,theidentificationofPurify,constructionofgeneticmap,genemapping,geneticrelationshipandgeneticdiversityofplantgermplasmresourcesaboutLegumes.Keywords：ISSR;molecularmarker;Legumes;geneticdifference豆类是我国一种重要的粮食经济作物，其屮黑豆具有高蛋白、低热

4、量的特性，其蛋白质含量高达36%—40%,相当于肉类含量的2倍、鸡蛋的3倍、牛奶的12倍；富含18种氨基酸，特别是人体必须的8种酸含量，比美国FoodandDrugAdministration(FDA)规定的高蛋口质标准述高。黑豆述含有19种油脂，不饱和酸含量达80%,吸收率高达95%以上，除能满足人体对脂肪的需要外，述冇降低血液屮胆固醇的作用，尤英青子叶黑大豆药效更显著。黑豆长期作为牲畜的饲料使用，而它的保健价值被人们所忽略。随着生活水平的提高，人们会更加注重身体健康也会更加注重黑豆的研究进展

5、。以往研究和分析豆类的品种鉴定、纯度鉴定、遗传图谱构建、基因定位、亲缘关系、种质资源遗传多样性及遗传育种多采用形态标记、系谱分析和同功酶技术，但它们均表现出一定的局限性"叫。80年代以来建立在分子遗传学基础上的分子标记技术(RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR等)的迅速发展，促进了作物育种在各个研究领域的发展，同时也推动了豆类在各个研究领域的发展。ISSR分子标记技术以其稳定、方便、快捷以及多态性丰富等优点⑸，是其它分子遗传标记无法比拟的。1ISSR分子标记及其技术原理简单序列重复区间

6、扩增多态性(Inter-Simplesequencerepeat,ISSR)是一种新型的分子标记，是由ZietkiewiczE.等于1994年创建的一种简单序列重复区间扩增多态性分子标记。它是利用真核生物基因组中广泛存在的简单重复序列(SSR)设计引物，无需预先克隆和测序。用于ISSR-PCR扩增的引物通常为16〜18个碱基序列，由1〜4个碱基组成的串联重复和几个非重复的锚定碱基组成，从而保证了引物与基因组DNA中SSR的亍或3,末端结合，导致位于反向排列，间隔不太大的重复序列间的基因组阶段进行

7、PCR扩增，而不是扩增SSR木身。ISSR是一种在PCR中直接使用微卫星序列进行DNA扩增的分了标记，貝有如下特点：1）扩增基因组DNA,适用于任何富含SSR重复单元和SSR广泛分布的物种，可同时提供多位点信息和揭示不同微卫星座位个体间变界的信息；2）为显性标记，符合孟德尔遗传规律；3）遗传多态性高。ISSR技术采用了较长的引物，因此引物具有更强的专一性，与模板结合的强度提高，降低了杂带的干扰，随之提高了实验结果的可重复性；4）无需知道任何靶标序列的SSR背景信息。用于ISSR分析的引物可基于任

8、何在微卫星位点发现的SSR重复单元（2,3或4个核甘酸等），并且侧翼靶标简单序列重复的任何一端均能够锚定基因组序列。ISSR标记技术的原理和操作与SSR非常相似，但在引物设计上比SSR技术简单得多，乂可以揭示比RFLP,SSR,RAPD等技术更高的多态性⑹。该技术现已在遗传作图、基因定位、遗传多样性、进化、系统发育等研究方面被广泛应用⑺,但在豆类研究上报道较少尤其是黑豆。文中简要介绍了近年来ISSR分子标记技术在豆类研究屮的应用现状，并对其前景进行了展望。2ISSR技术在豆类研究中的应用2.1遗