临床医学毕业论文急性白血病原代细胞tgf-βⅱ型受体同种型的发现及其临床意义

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1、XX大学毕业论文急性白血病原代细胞TGF,II型受体同种型的发现及其临床意义姓名：2014年6月25日急性白血病原代细胞TGF-pII型受体同种型的发现及其临床意义作者：陈萍，陈元仲，吴勇，黄慧芳，李乃农【摘要】转化生长因子卩（TGF・

2、3）及其受体的基因突变已被证实在肿瘤形成屮具有重要的作用，在许多肿瘤屮都发现有TGF-pII型受体（邛R・II）表达异常或表达缺失。为了了解急性口血病患者TPR-II基因是否存在异常，本研究应用大范围RT-PCR的方法分段扩增急性白血病原代细胞邛R・II的编码序列

3、，并结合序列测定技术，分别对6例急性口血病患者以及11例止常人邛R・II的编码序列进行突变检测。全部患者经骨髓细胞形态检查符合FAB诊断标准11骨髓原始细胞290%。肝素抗凝骨髓4・5ml,分离单个核细胞，用TRIZOL试剂提取总RNA,反转录后行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物。冋收目的片段，克隆到PGEM-T载体，进行序列的测定。结果显示：在检测的病人屮冇2例病人中存在邛R・II的同种型，而此2例病人临床预后不良。结论：部分白血病病人存在TpR-II的同种型，而11该同种型可能与预后有

4、关。【关键词】急性口血病IdentificationoftheIsoforminTypeIIReceptorofTransformingGrowthFactor-betainPatientswithAcuteLeukemiaandItsClinicalSignificanceAbstractRecentresearchindicatesthatTGF-卩andtypeIIreceptor（T卩R・II）playanimportantroleinthepathogenesisoftumor.Ahig

5、hfrequencyofabnormalitiesinTpR-IIhasbeendemonstratedinvariouscancers.ToidentifythemutationofTpR-IIinpatientswithacuteleukemia,thebonemarrowsamplesfrom6patientswithacuteleukemiaand11normalindividualsascontrolweredetectedbylong-rangeRT-PCR.Todetectadele

6、tioninsequenceoftheT[3R・IIgene,thePCRproductswereclonedtoTvectorandthenscqucnccd.ThcresultsshowedthattherewascxistanccoftheisoformofTpR-IIin2casesoutof6patientswithacuteleukemia.Thesetwopatientshadmorepoorprognosisthanothers.Inconclusion,therewastheis

7、oformofT［3R-IIinpartialpatientswithacuteleukemia,andtheisoformmayberelatedwithprognosis.Keywordsacuteleukemia;TpR・II;isoformreceptorTGF-p信号转导通路在调节多种细胞的增殖与分化、诱导细胞凋亡等方面具有重要的作用，有研究表明这一通路的紊乱可以导致多种肿瘤的发生［1］OTGF-p受体（TpR）冇3种亚型即邛R-I>TpR-II和邛R・III,其中TpR-II和TGF•

8、卩貝有较高的亲和力，在TGF-P介导的信号转导中起着重耍的作用，在许多肿瘤如慢性淋巴细胞白血病、人类表皮T细胞淋巴瘤患者中［2-3］均观察到邛R・II表达缺陷。口前对于急性白血病原代细胞是否存在邛R・II缺陷未见报道。本研究通过应用大范围RT-PCR技术分段扩增急性口血病原代细胞TpR-11的编码序列，进行序列的测定，结合收集的病人的临床资料，初步探讨TGF-pII型受体（T0R・II）在急性口血病发病机制中所起的作用。材料和方法研究对彖实验组6例，男5例，女1例，平均年龄47±18.6岁（30・

9、66岁），为2003年4月・2004年2月福建医科大学附属协和医院血液科住院或门诊白血病病人，均为初治患者，其中急性淋巴细胞口血病2例（均为L2）,急性非淋巴细胞口血病4例（Ml2例，M21例，M51例）按FAB分型诊断明确，其骨髓原始细胞290%。正常对照组11例，男9例，女2例，年龄28±7.2岁（21-35岁），均为健康供髓者。单个核细胞的制备采集骨髓，以肝素（40U/ml）抗凝。加入37°C温浴的2%甲基纤维素（华美公司产品）至其终浓度为0.1%,混匀，于37°C、5%CO