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《产L-木酮糖菌株的筛选与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、产L-木酮糖菌株的筛选与鉴定摘要从十-壤屮分离出一株具有氧化多元醉生产酮糖能力细菌ZN-14。这个菌种在37°C静息细胞反应牛•产一种稀有戊酮糖——【厂木酮糖。在対其常规形态学及牛理牛化特性鉴定，结果表明，该菌株与巨大芽他杆菌的表型特征非常相似。为进一步确定ZN-14的分类学地位,对部分长度的16SrDNA同源性进行了分析，结果表明菌株ZN-14与巨人芽抱杆菌的亲缘关系最近。综合上述结果，鉴定菌株ZNT4为巨大芽他杆菌〈Baci!1usmogaterium）。关键词L-木酮糖，巨大芽砲杆菌，生物转化ScreeningandIdentificationofL-x
2、ylulose-producingStrainsABSTRACTAnovelbacteriumcapableofproducingrareketosesfrompolyolswasisolatedfromsoilandnamedasZN-14.WehaveemployedthisisolatedstrainfortheproductionofL^xylulose,arareketopentose,fromxylitolbyarestingcellreactionat37°C.ThestrainisverysimilartoBacillusmegateriumi
3、nmostofthephenotypesintraditionalphysiologicalandbiochemicalaspects,aswel1asinmolecularphylogeneticdendrogrambuiltfrom800bp16SrRNAgenesequencewithwhichthoseofrelatedstrainswerecompared.Therefore,thestrainZNT4wasidentifiedasBacillusmegaterium.KeywordsL-xylulose,Bacillusmegaterium,bio
4、transforimUion【「木酮糖（L-Xylulose）是一种戊酗糖，存在多数生物的新陈代谢中，这种碳水化合物在自然界的浓度很低，因此是一种稀有糖［］。L-木酮糖是酵母和大豆糖昔酶的抑制剂［］,同时也应用于医药和临床诊断，是急性慢性肝炎和肝硬化可靠的指示剂。L-木酮糖可以作为I厂木糖、I厂来苏糖等稀冇糖的起始物质【】。目前，已有几种I厂木酗糊生产方法见诸报道。Larson等以D-山梨糖醇为原料通过化学法合成1厂木酮糖，存在生产路径复杂并且产量低等缺点［］。近年來，研究人员一直在寻找利用牛物转化的方法來牛产L-木酮糖。1956年美国科为家霍尔曼和陶斯特报道
5、利川豚鼠肝脏线粒体将木糖醇转化为L-木酮糖是生物转化法生产L-木酮糖最早的报道【】。此后，科学家陆续发现Pantoeaananatis（菠萝泛菌）【】、Alcaligenes（产碱杆菌）【】和Bacilluspallidus（苍白芽他杆菌）【】的静息细胞同样具有以木糖醇为原料转化生产L-木酮糖的能力。因此若能筛选获得一株性能优良的【广木酮糖生产菌株，对开发具冇自主产权的稀冇糖研究具有重大现实意义。1材料与方法1.1土样来源参照七样采集标准方法【】，26个土壤样品采白济南、泰安、淄博、威海、大同、通辽等地，草坪下或树林中的土样采样时先除去表层5cm表土，取5〜1
6、5cm深的土壤，采集时间均为2011年9月15FI至10月10Ho1.2培养基1.2.1富集培养基（MS培养基）（g/L）木糖醇10,酵母膏5,（NH4）2SO42.6,KH2PO42.4,K2HPO<5.6,MgS04•7H200.1,pH7.0,121°C灭菌20mino1.2.2平板培养基（g/L）木糖醇10,酵母膏5,（NHi）2SO,2.6,KH2PO42.4,K2HPO45.6,MgSOi•7H200.1,琼脂20,pH7.0,121°C灭菌20mino1.2.3斜面培养基（g/L）木糖醇10,酵母膏5,蛋白腺5,NaCl5,琼脂20,pH7.0,
7、121°C灭菌20mino1.2.4种子培养基（g/L）木糖醇10,酵母膏5,蛋白月东5,NaCl5,pH7.0,121°C灭菌20min。1.2.5发酵培养基（g/L）木糖醇30,酵母膏5,蛋白陈5,NaCl5,KH2P042.4,K2HP045.6,MgS04-7H200.4,CaCl2•2H200.03,MnS04•H200.04,FeS04•7H200.03,pH7.0,121°C灭菌20min<>1.2.6牛肉膏蛋口J］东琼脂培养基（g/L）牛肉膏5,蛋白W10,NaCl5,琼脂20,pH7.0,121°C灭菌20mino1.3菌株的分离纯化将采集样
8、品经处理后装入到含有30mL富集培养基
