2019-2020年高中生物 专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定练习 新人教版选修1

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1、2019-2020年高中生物专题5课题1DNA的粗提取与鉴定练习新人教版选修1一、DNA的粗提取和鉴定1.DNA的粗提取(1)基本思路:利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。(2)方法和原理:①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。②DNA不溶于酒精,但是某些蛋白质则可溶于其中。③蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。④大多数蛋白质不能忍受60~80_℃的高温而发生变性,而

2、DNA在80_℃以上才会变性。⑤洗涤剂能瓦解细胞膜,但对DNA无影响。2.DNA的鉴定在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。二、实验设计1.选取实验材料选用DNA含量较高的生物组织,成功的可能性更大。2.破碎细胞,获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易,例如,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。3.去除滤液中杂质(1)方案一:通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。(2)方案二:直接向滤液中加入嫩肉粉,反应10~15min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白

3、质。(3)方案三:将滤液放在60~75_℃的恒温水浴箱中保温10~15min,注意严格控制温度范围,使蛋白质沉淀析出而DNA分子还未变性,可以将DNA与蛋白质分离。4.DNA的进一步提纯利用DNA不溶于冷却的4.95%酒精这一原理,可从滤液中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为白色丝状物。5.DNA的析出与鉴定(1)DNA的析出:DNA的析出用的是与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液。(2)DNA鉴定:鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为2_mol/L的NaCl溶液5mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物,各加入二苯胺4_mL。在沸水

4、浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。三、操作提示 (1)以血液为实验材料时,每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止血液凝固。(2)加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。(3)鉴定DNA用的染色剂二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。一、选择题1.由于鸡血没有找到,某同学尝试用猪的血液来代替,但结果没有成功,其最可能的原因是(B)A.操作方法不对 B.猪血

5、含DNA过少C.NaCl溶液浓度太高 D.加二苯胺过少解析:猪的血液中主要是红细胞,但猪的成熟红细胞中无细胞核,所以猪血细胞中DNA含量低。2.DNA在下列浓度的NaCl溶液中,溶解度最低的是(C)A.2mol·L-1  B.0.015mol·L-1C.0.14mol·L-1D.5mol·L-13.DNA的粗提取与鉴定实验,与下列哪项原理无关(B)A.DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中,溶解度最低B.DNA易被龙胆紫溶液染成紫色C.DNA溶液中加入二苯胺试剂,加热后产生蓝色D.加入95%的冷酒精,DNA会从溶液中析出解析:DNA在

6、0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。DNA鉴定选用的试剂为二苯胺试剂,加热后(沸水浴)产生蓝色。加入95%的冷却的酒精,由于DNA不溶于酒精,DNA会从溶液中析出。4.在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是(B)A.用蒸馏水将NaCl溶液的物质的量浓度调至0.14mol/L,滤去析出物B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质C.将丝状物溶解在物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色D.用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同解析:用蒸馏水将NaCl溶液

7、物质的量浓度调至0.14mol/L,使DNA析出;调节NaCl溶液的物质的量浓度为2mol/L,过滤可除去不溶的杂质,木瓜蛋白酶能够分解蛋白质;在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺试剂会被染成蓝色;如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂瓦解细胞膜。5.在DNA析出与鉴定实验中加入酒精的目的是(B)A.溶解DNAB.除去DNA中所含的杂质C.析出蛋白质D.稀释溶液,降低浓度解析:DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液而蛋白质可溶,从而把蛋白质和DNA分开。6.下列叙述中错误的是(A)A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在

8、沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.加盐和加酒都能抑制微生物的生长D.密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染解析:当NaCl溶液的浓度低于0.14mol/L时,随浓度的升高,DNA的溶

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