2015-2016高中生物 专题5 课题1 dna的粗提取与鉴定练习 新人教版选修1

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1、课题1　DNA的粗提取与鉴定一、DNA的粗提取和鉴定1．DNA的粗提取(1)基本思路：利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。(2)方法和原理：①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。②DNA不溶于酒精，但是某些蛋白质则可溶于其中。③蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。④大多数蛋白质不能忍受60～80_℃的高温而发生变性，而DNA在80_℃以上才会变性。⑤洗涤剂能瓦

2、解细胞膜，但对DNA无影响。2．DNA的鉴定在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。二、实验设计1．选取实验材料选用DNA含量较高的生物组织，成功的可能性更大。2．破碎细胞，获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。3．去除滤液中杂质(1)方案一：通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。(2)方案二：直接向滤液中加入嫩肉粉，反应10～15min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。(3)方案三：将滤液放在60～

3、75_℃的恒温水浴箱中保温10～15min，注意严格控制温度范围，使蛋白质沉淀析出而DNA分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分离。4．DNA的进一步提纯利用DNA不溶于冷却的4.95%酒精这一原理，可从滤液中析出较纯净的DNA，此时DNA的状态为白色丝状物。5．DNA的析出与鉴定(1)DNA的析出：DNA的析出用的是与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液。(2)DNA鉴定：鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为2_mol/L的NaCl溶液5mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物，各加入二苯胺4_mL。在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺

4、会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。三、操作提示　(1)以血液为实验材料时，每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液凝固。(2)加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。(3)鉴定DNA用的染色剂二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。一、选择题1．由于鸡血没有找到，某同学尝试用猪的血液来代替，但结果没有成功，其最可能的原因是(B)A．操作方法不对　B．猪血含DNA过少C．N

5、aCl溶液浓度太高　D．加二苯胺过少解析：猪的血液中主要是红细胞，但猪的成熟红细胞中无细胞核，所以猪血细胞中DNA含量低。2．DNA在下列浓度的NaCl溶液中，溶解度最低的是(C)A．2mol·L－1　　B．0.015mol·L－1C．0.14mol·L－1D．5mol·L－13．DNA的粗提取与鉴定实验，与下列哪项原理无关(B)A．DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中，溶解度最低B．DNA易被龙胆紫溶液染成紫色C．DNA溶液中加入二苯胺试剂，加热后产生蓝色D．加入95%的冷酒精，DNA会从溶液中析出解析：DNA在0.14m

6、ol/L的NaCl溶液中溶解度最低。DNA鉴定选用的试剂为二苯胺试剂，加热后(沸水浴)产生蓝色。加入95%的冷却的酒精，由于DNA不溶于酒精，DNA会从溶液中析出。4．在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是(B)A．用蒸馏水将NaCl溶液的物质的量浓度调至0.14mol/L，滤去析出物B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C．将丝状物溶解在物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同解析：用蒸馏水将NaCl溶液物

7、质的量浓度调至0.14mol/L，使DNA析出；调节NaCl溶液的物质的量浓度为2mol/L，过滤可除去不溶的杂质，木瓜蛋白酶能够分解蛋白质；在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺试剂会被染成蓝色；如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂瓦解细胞膜。5．在DNA析出与鉴定实验中加入酒精的目的是(B)A．溶解DNAB．除去DNA中所含的杂质C．析出蛋白质D．稀释溶液，降低浓度解析：DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液而蛋白质可溶，从而把蛋白质和DNA分开。6．下列叙述中错误的是(A)A．改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出

8、B．在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C．加盐和加酒都能抑制微生物的生长D．密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染解析：当NaCl溶液的浓度低于0.14mol/L时，随浓度的升高，DNA的溶解度降低；当NaCl溶液的浓度高于0.14mol/