果酒酵母实验报告材料

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1、实用文档果酒酵母的分离纯化及选育大全实用文档果酒是利用新鲜水果为原料，在保存水果原有营养成分的情况下，利用自然发酵或人工添加酵母菌来分解糖分而制造出的具有保健、营养型酒。果酒富含多种氨基酸、维生素及矿物质等营养成分，还含有丰富的生理活性物质，经常适量饮用具有一定的保健作用。酵母品种是酿造果酒的关键因素之一，酵母性状的好坏直接影响到所酿果酒的口感和风味，决定果酒品质的优劣。果酒酵母包括醇酿酒酵母和非酿酒酵母，前者的应用提高了果酒酿造的生产效率，后者的应用则对果酒的总体风味产生积极的影响。野生型果酒酵母经分离纯化后，结合诱变、杂交

2、、原生质体融合、基因工程及其他育种技术，其酿造性能显著提高，酿造的果酒品质明显改善，因此果酒酵母的选育研究得到了重点关注。本实验选用葡萄为原料，分离纯化了3株酵母菌，并对其筛选使其适合果酒酿造。一、实验目的1、学习掌握果酒酵母分离纯化的方法；2、对分离纯化得到的酵母菌进行筛选使其适合果酒酿造。二、实验原理酿酒酵母细胞透明，呈圆形或椭圆形，形体比较大，一般为7×12μm，含有转化酶能将葡萄汁中的糖转化成乙醇、二氧化碳和其它代谢产物。优良纯种酵母应具备下列性能：1、除酿酒水果本身的果香外，酵母也应产生良好的果香与酒香。2、生长速度

3、快，有较高的发酵能力，能将糖分全部发酵完。3、具有较高的抗S02能力，有较好的凝集力和较快的沉降速度。4、培养基成分简单，来源广泛，价格低廉，对温度，pH，离子强度，溶氧等环境因素不敏感。5、能在低温或果酒适宜温度下发酵，以保持果香和新鲜清爽的口味。由此可见，酵母的品质对果酒的产量和质量影响很大。要获得优良的酿酒酵母，必须对其进行分离选育。果酒酵母的筛选应从相应的果品及其种植环境中采样分离，如成熟果实的表皮、自然腐烂发酵的果肉或果汁和果园的土壤等相关场所。根据实践经验，在果汁和自然发酵的果酒醪液中检出率较高，因为它们的基质环境

4、与酿酒环境很相似。为使我们需要的酵母易于检出，应对采集的样品进行富集培养，通过设置较高的酒精浓度、添加SO2、调整pH 大全实用文档等手段抑制不需要的微生物的生长，使希望检出的微生物得到增殖。酵母检出后，应对其的发酵性能进行考察，包括酵母的一系列生理生化特性和风味物质形成的能力等，这些可通过作生理生化实验和三角瓶小型发酵实验分析和测定。三、实验仪器与材料富集培养基：乳酸马铃薯葡萄糖培养液：马铃薯200g，葡萄糖20g，乳酸20g，蒸馏水1000ml（先将马铃薯去皮、切片，称200g，并加蒸馏水1000ml，煮沸半小时，用纱布过

5、滤，补足蒸馏水量至1000ml，制成20%的马铃薯汁，在20%的马铃薯汁中加入乳酸，煮沸融化，加入葡萄糖，补足水分并在121摄氏度条件下，高温灭菌30分钟）酿酒酵母培养基：马铃薯葡萄糖琼脂培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，制法同上。器具：15个培养皿、12支试管、4个100ml锥形瓶、3个250ml烧杯、30个试管、30个杜氏管、1个试管架、7个三角瓶，无菌滴管，接种环，酒精灯，玻璃涂棒，冰箱，高温灭菌锅，水浴锅，显微镜，血球计数板，恒温培养箱、恒温摇床。四、实验内容及步骤1、酵母的分离与纯

6、化1.1接种：取成熟的苹果的小块果皮直接接入250ml锥形瓶含有150ml的乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，需要三组，置于28摄氏度恒温摇床中，转速为120，震荡培养48h；将苹果果皮研磨直接接入马铃薯葡萄糖琼脂培养基中，需要三组，置于29摄氏度恒温培养箱中，培养48h；1.2培养：用无菌吸管吸取上述培养后培养液1ml，置于9ml的无菌水中，稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5；1.3分离、纯化：大全实用文档马铃薯葡萄糖培养基溶化后制成平板，用1ml的无菌吸管，分别吸取10-3、10-4、10-5置于培养基表面，用

7、无菌的玻璃涂棒迅速涂抹均匀，培养基做好标记，放于恒温培养箱培养大约两天，培养基倒置，菌落长出后，观察其菌落并用显微镜查菌体数。一般一个单独的菌落可视为一个细胞发育而来，是纯培养，如果结构复杂未得到纯培养，可进行再次分离培养知道纯化为止，步骤如下：A.将融化了的马铃薯葡萄糖琼脂培养基倒入无菌培养皿中，每皿大约15ml，冷凝成平面，记上标记；B.用平板划线法接种（一）右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，挑取菌体培养物少许。（二）左手斜持琼脂平板，于火焰近处将菌涂于琼脂平板上端，来回划线，涂成薄膜（约占平板总表面积的十分之一），划线时

8、接种环与平板表面成30~40º角，轻轻接触，以腕力在平板表面行轻快地滑移动作，接种环不应划破培养基表面。（三）烧灼接种环，杀灭环上残留细菌，待冷（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从薄膜处取菌作连续平行划线，约占平板表面五分之一左右，再次烧灼