资源描述：
《HBV耐药性及防治策略》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、实用HBV耐药性及防治策略南昌市第九医院 徐龙乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)是目前世界上流行最广泛的病毒之一，HBV有较高的变异性，其原因是由于HBV的复制是通过RNA中间体（前基因组RNA）利用病毒本身的DNA多聚酶（polymerase）─DNA-P反转录成负链DNA，在反转录过程中，DNA-P缺乏校对酶活性，不能修正核苷酸的错配，导致HBVDNA序列发生变异。HBVDNA至少含有4个开放读码框(open-readingframes，ORF)，即S区(包括S区、前S1区和前S2区)、C区(包括C区和前C区)、P区和X区。本文就H
2、BV耐药及防治策略的最新研究进展作一综述。 一、HBV 分子结构及复制周期HBV属于嗜肝DNA病毒,其基因全长仅3.2kb。在HBV包膜内,HBV基因以不完全双链环状DNA形式存在。HBV 感染人体肝细胞后,将包膜内HBVDNA释放入肝细胞核内并形成共价闭合环状DNA(cccDNA)。宿主RNA聚合酶以cccDNA为模板,转录成mRNA。mRNA亦为前基因组RNA。HBV多聚酶以前基因组RNA为模板,逆转录合成负链HBVDNA,然后再以负链DNA为模板合成正链HBVDNA。最终形成子代HBVDNA。由此可见,HBV多聚酶在HBV复制过程中起着至关重要的作用。二、H
3、BV 耐药突变的定义及命名文档实用病毒对抗病毒药物的耐药分为表型耐药和基因型耐药。表型耐药是指：在治疗期间病毒水平上升，一般用抗病毒药物浓度（IC50）测定，IC50增加说明药物敏感性下降或耐药程度增加，需要更大的药物剂量才能抑制变异的病毒。基因型耐药是指病毒聚合酶基因突变，形成新的病毒基因序列，一般采用DNA测序、基因芯片等方法测定。发生变异的病毒常可改变其生物学特性，给临床的防治带来一系列问题。针对HBV耐药可分为表型耐药、基因型耐药、临床耐药，临床耐药(clinicalresistance)指临床出现病毒复制不能被抑制,或HBV复制一度被抑制后又出现HBVD
4、NA反跳,同时并伴有ALT升高。已知核苷类药物耐药突变均发生在HBV多聚酶(DNA-P)上。HBV分为8个基因型(A～H)。各基因型HBV多聚酶长短不尽相同。以A基因型HBV为参照,HBV多聚酶总长845个氨基酸。HBV多聚酶可分为4个功能区:终端蛋白(terminalprotein)、间隔区(spacer)、逆转录酶区(reversetranscriptase)及RNA降解酶区(RNaseH)。HBV耐药变异以国际通行的氨基酸单字母加变异位点来标记。例如,YMDD代表逆转录酶区的4个氨基酸(酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸),其中的蛋氨酸(M)变为亮氨酸(V)
5、或异亮氨酸(I)则会引起拉米夫定耐药。起初,HBV耐药突变的位置是从HBV多聚酶的第一个氨基酸数起。由于HBV8个基因型的HBV多聚酶长短不同,以不同HBV基因型为参照,YMDD所处的位点不同。同样的YMDD变异被报道成M552V、M550V、M539V等不同命名。为避免混乱,Stuyverg等提议将HBV耐药突变统一从逆转录酶功能区(各基因型均为344个氨基酸)的第一个氨基酸数起并加前缀rt(例如YMDD变异被命名为rtM204V)。HBV多聚酶逆转录酶区包含7个基因保留亚区(A～G)。拉米夫定耐药突变主要发生在B和C亚区中。HBV多聚酶逆转录酶的三维结构犹如一
6、只半张开的右手。B和C亚区均位于手掌部位,紧靠拉米夫定结合位点。rtM204V或rtM204I文档实用突变是引起拉米夫定耐药的一个直接因素。从分子结构上讲,V和I均比M多了一个β甲基。而这个多出来的甲基造成拉米夫定结合位点的空间拥挤,从而使拉米夫定不能有效地与HBV多聚酶结合。三、HBV 耐药突变的机制由于HBV在体内复制的过程需要经过逆转录这一步骤,在反转录过程中，DNA-P缺乏校对酶活性，不能修正核苷酸的错配，导致HBVDNA序列发生变异，HBV复制中的天然复制错误率比其它DNA病毒要高10倍左右。HBV基因在复制过程中不断产生天然变异,因而在HBV感染者体内
7、常形成一群由基因十分相似、但不完全等同的病毒株组成的准种(quasispecies)。在未接受过核苷类药物治疗的患者中,HBV野型株占HBV准种的绝大多数。耐药变异株在患者用药前就可能存在,也可在用药过程中产生。患者用药后,对药物敏感的野型病毒株受到抑制。含有耐药突变的病毒株得以有更多空间进行复制。当对某一药物有耐药性的病毒株成为准种中的主要病毒株时,此药就失去疗效。四、主要HBV耐药突变治疗乙型肝炎的核苷类药物主要是通过与HBV多聚酶的天然底物(dNTP)竞争来达到抑制HBV多聚酶的活性,从而达到抑制HBV复制的作用。P基因区是HBV基因组中最大的ORF，全长2
8、496bp
