生猪养殖策略思索

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1、生猪养殖策略思索谷氨酰胺二肽相对于谷氨酰胺单体，溶解度高.热稳定性好，并能够被小肠黏膜完整吸收，然后在肠黏膜、肝、肾、骨骼肌等组织器官中被快速分解，产生体内所需的氨基酸，提高血浆中谷氨酰胺浓度.从而发挥谷氨酰胺的作用（周荣艳和彭健，2005）o常见的谷氨酰胺二肽有甘氨酰谷氨酰胺二肽和丙氨酰一L一谷氨酰胺二肽（俗称力肽）两种类型，其可分解产生谷氨酰胺。木文对目前谷氨酰胺二肽合成方法及其在畜牧养殖中的应用作一综述。1谷氨酰胺二肽合成方法目前.国内外已知的二肽及多肽合成方法主要有四类：生物酶法、微生物发酵法、化学反应法和多肽固相合成法。1.1生物酶法生物酶法是指通过一些具有生物活性和专一性的分解酶（

2、天然或化工合成）水解冃标大分子蛋白质，形成具有生物活性的小分子肽和氨基酸；或通过氨基酸合成酶进行氨基酸的组装与成肽（林军，2009；黄惟德，1985）o其特点是反应条件温和，原料廉价易得，但存在酶解效率不高.产物活性较低的问题。此外，分解物中具有生物活性的肽片段从两个氨基酸到十儿个氨基酸不等.得到的产品中副产物居多，目标产物纯度较差.后续分离提纯过程繁琐，导致总体产率偏低（马海斥等，2010；徐力等，2004）。1.2微生物发酵法发酵法是指利用特定微生物的代谢活动将廉价原料转变为目标多肽的方法，其特点是发酵使用的细菌或酵母易于培养，原料获取方便,条件容易控制（汤亚杰等，2007；陈坚等，200

3、4）。但酵母细胞中目标活性肽含量较低，酵母用量大，收率低，远远不能满足市场需求，理论上仅为一种多肽生产方式，可以在实验室进行小剂量合成。1.3化学反应法化学反应法是通过一系列化学反应对氨棊酸前期处理，然后进行肽键缩合的合成方法，是目前二肽及多肽小分子的研究热点，其应用前景最为广阔。这是因为化学合成法反应机理和操作方法多样，反应条件易于控制，反应迅速、彻底，而且各个步骤产率高，产品专一性较好，具备工业化生产的理论条件。但氨基酸在屮性条件下是以分子内的两性离子形式（+H,NCH（R）C00-）存在，氨基酸Z间直接缩合成酰胺键的反应在一般条件下难以进行：而且氨基酸肽酯反应无定向性，产物易发牛消旋，若

4、反应物侧链官能团处理不当，易引入副产物（杨梅林，2006）。此外，一些试剂，如催化剂、保护基团试剂等毒副作用大且价格昂贵，化学合成步骤较多，因此整体产率不高，且生产成本高，制约了该方法的广泛使用。目前国内外已有的谷氨酰胺二肽化学合成方法主要有以下几种。1.3.1活化酯法活化酯法合成多肽是目前为止一种较为常用的合成方法，通过氨基保护、竣基活化、肽键缩合、去除保护基团，最终得到目标产物(Kat。和Kurauchi,1999)o该方法的优点是反应条件温和，使1位酰胺基在反应中比较稳定，不易发生水解；缩合产物可以分离得到纯品；氢解后杂质较少,易于用重结晶法分离纯化：原料工业来源充足。但总体反应步骤较多

5、，且反应屮要用到一些价格较高的原料导致成本增大。因此，若将该工艺路线进行改进和优化.将会成为一种理想的制备谷氨酰胺二肽的方法。1.3.2酰氯法谷氨酰胺直接与0【一氯代酰氯在碱性条件下生成酰胺键。然后进行氨解得到最终产物，最后分离提纯即可得到目标产品。此法巧妙利用活性较大的酰氯与氨基酸中氨基进行反应，生成酰胺键，具有反应温和，合成路线短，收率高的优点.但常用的2-D-氯丙酰氯价格昂贵.氨解过程中可能发生消旋，得到消旋产物，难以分离。一种改进方式是原料采用谷氨酸，先在酸性条件下与醇形成谷氨酸脂，然后在pH二8左右与酰氯反应，最后进行氨解，得到谷氨酰胺二肽。此法的优点：一是避免了以往反应中1一酰胺的

6、水解，二是选用廉价的谷氨酸。降低生产成本.适合工业化生产(金辉，2003)o1.3.3酸酹法酸酹中拨基作为活性亲电中心，可以与带孤对电子的氨基发生亲核取代反应.形成肽键，得到二肽。目前已有的酸肝法是N—竣基内酸酊(NCA)法和混合酸酊法(Stehle等，1982)。区别在于前者通过甘氨酸或丙氨酸与光气二氯化碳环合生成N—竣基内酸酊：而后者是氨基酸与酯制的直链状酸阡。该方法的优点是反应条件温和，速度快，收率高，但是中间体N一竣基内酸肝不稳定，以及混合酸肝有两个拨基活性中心.若不采取对应措施易发生同等加成反应，得到难以分离的副产物，限制了其工业化应用。1.3.4保护1一酰胺法大多研究认为，谷氨酰胺

7、作为肠外营养物质不宜直接被机体吸收利用，主要原因是谷氨酰胺本身的水溶液稳定性差，口身的酰胺键易发生水解，生成对人体有害的环化产物一焦谷氨酸(李幼生和黎介寿，2002)oYasutsugu(1992)研究表明，使用咕吨氢醇将具保护起来再进行酯化缩合反应，避免了5酰胺基团的水解。这种方法可以避免L一谷氨酰胺的"一酰胺水解，但是无疑增加了操作步骤•而且咕吨氢醇价格昂贵，使得该方法仅理论可行。1.4固相合