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时间:2019-10-18
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1、梅毒的实验室诊断及其临床应用安徽省立儿童医院检验科一、概述梅毒螺旋体即苍白密螺旋体的苍白亚种,人是其唯一宿主。直径0.1—0.15μm,全长7--8μm。在电镜下可见有细胞壁和细胞膜。新鲜标本在暗视野显微镜下可观察其形态和活泼的运动方式。梅毒螺旋体对外界的抵抗力极弱,离体后1-2小时即死亡,对热和干燥特别敏感,40℃~60℃时2~3分钟就能死亡,100℃时则即刻死亡。血液中4℃放置3天可死亡,因此4℃血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险。对肥皂水和常用化学消毒剂亦敏感,1%--2%石炭酸内数分钟就死亡;对化学药品也很敏感,肥皂水、来苏水、1∶1000的高锰酸钾液对它都有杀灭作用。但是在缺氧
2、的环境下它能生存数天,在潮湿的衣服上也能存活数小时。了解了梅毒螺旋体的特性,我们就可以针对其弱点将它消灭。如将衣物放于阳光下曝晒,放在干燥的环境中储存;将用具煮沸消毒或用化学用品消毒,都能杀灭梅毒螺旋体,阻止它的传播。梅毒螺旋体主要有两种抗原:1、密螺旋体抗原即梅毒螺旋体表面的特异抗原,与雅司病(皮肤损伤)、地方性梅毒(粘膜损伤)、品他病(皮肤损伤)等3种密螺旋体有共同抗原,可交叉反应。2、非螺旋体抗原即磷脂类抗原,可刺激机体产生反应素,其与牛心肌的心脂质抗原发生反应,此法敏感性高,但有假阳性。梅毒的免疫属感染性免疫,有梅毒螺旋体感染时才有免疫力,一旦螺旋体被杀灭,其免疫力随之消失。机体对梅
3、毒螺旋体感染可产生细胞免疫和体液免疫反应,体液免疫中有两种抗体:一种是梅毒特异性抗体,主要是IgG、IgM,对螺旋体有制动作用,当有补体存在时,可将其杀死和溶解,对机体的再感染有保护作用。另一种是抗脂质抗体的反应素,为IgG和IgM的混合物,对机体无保护作用。梅毒主要是通过性接触传播,占95%以上,还可以通过胎盘传播给下一代,发生胎盘梅毒。还有一些比较少见的感染途径,如接吻、哺乳等,此外输血也可以传播。二、临床表现及其分期梅毒其病程漫长,临床表现极为复杂,几乎可侵犯全身各种组织和器官,可反复发作。早期主要侵犯皮肤黏膜,晚期侵犯内脏器官,严重者可引起严重的心血管系统和神经系统损害。临床上分为获
4、得性梅毒(后天梅毒)和先天性梅毒(胎盘梅毒),获得性梅毒根据其发展经过一般分为三期。一期梅毒:一般在感染后的3周发生,主要表现为硬下疳。二期梅毒:发生于感染后的6-8周。主要表现为全身皮肤粘膜出现梅毒疹。三期梅毒:发生于感染后的2年,可出现皮下树胶肿(梅毒瘤)、神经梅毒、心血管梅毒。三、实验室诊断(一)、显微镜检查:直接观察分泌物中的梅毒螺旋体,如见到运动活泼的苍白螺旋体可直接诊断梅毒,是最特异、最准确的诊断方法,但灵敏度低。暗视野显微镜检查(DF)直接免疫荧光检查镀银染色法多功能显微诊断仪(MDI)暗视野显微镜检查(DF)是诊断早期梅毒唯一可靠的实验室方法,特别是血清学反应阴性者,镜检阳性
5、有确诊意义,可直接观察到病灶分泌物中的梅毒螺旋体。该方法不仅操作简单,且经济、快速,但此法对晚期及隐性梅毒或口腔病灶标本不适用。Ⅰ期梅毒--取硬下疳渗出液;Ⅱ期梅毒--取梅毒疹渗出液或局部淋巴抽出液。对Ⅰ期梅毒末期以后(大约感染3-4周以后)的病人可分离血清检查有无梅毒螺旋体抗体和反应素。直接免疫荧光检查弥补了DF的缺点,可用于口腔病灶的检查。镀银染色法梅毒螺旋体染成棕黑色,背景染成淡棕色。银染色的阳性结果需谨慎解释,因为类似梅毒螺旋体的其他物质易混淆。多功能显微诊断仪(MDI)是近年来国外开发的一种综合相差对比、暗视野及偏振光的可变投影显微镜,其特点是待检查标本不需染色及任何加工处理,而是
6、将“活的”真实的样品直接进行观察,具有直接、方便、快速的优点。但整套仪器价格昂贵,很难普及到各个梅毒检测实验室。镀银染色法梅毒螺旋体染成棕黑色,背景染成淡棕色。(二)、血清学实验是诊断梅毒的主要方法根据所用抗原不同可分为两类:非梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验原理梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放类脂物质,同时它自己细胞表面也可以释放这种类脂物质,类脂物质刺激机体产生抗类脂抗体(抗心磷脂),在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应,形成凝集反应(抗原抗体凝集反应)。目前为多数医院的梅毒常规筛查试验。这类试验可观察疗效、复发及再感染,适于二期梅毒的诊断,而
7、不适于诊断一、三期梅毒,包括潜伏梅毒、神经梅毒的诊断。方法性病研究实验室试验(venerealdiseaseresearchlaboratorytest,VDRL):美国Pangborn等发现一种性病研究实验室抗原(VDRL),是从牛心肌中提取的心拟脂,适量加入胆固醇及卵磷脂以提高敏感性,通常称这种抗原为心拟脂抗原。VDRL试验属于微量玻片法,是唯一推荐用于检测脑脊液反应素的试验,对诊断神经梅毒具有重要价值,
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