温补肾阳法对抑郁模型大鼠海马AC-cAMP-PKA信号通路及脑组织病理形态的影响

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1、成都中医药大学2017届硕士研究生学位论文ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine（基础医学院）二〇一七届硕士研究生学位论文温补肾阳法对抑郁模型大鼠海马AC-cAMP-PKA信号通路及脑组织病理形态的影响Impactofkidney-warmingtherapyonthehippocampusAC-cAMP-PKAsignalpathwayandbraintissuepathomorphologyofdepressionmodelrats研究生姓名：彭杨芷指导教师：江泳教授学科专业：中医临床基础二○一七年四月1万方

2、数据成都中医药大学2017届硕士研究生学位论文学位论文温补肾阳法对抑郁模型大鼠海马AC-cAMP-PKA信号通路及脑组织病理形态的影响Impactofkidney-warmingtherapyonthehippocampusAC-cAMP-PKAsignalpathwayandbraintissuepathomorphologyofdepressionmodelrats彭杨芷指导教师姓名：江泳教授申请学位级别：硕士学位专业名称：中医临床基础论文提交时间：2017年4月论文答辩时间：2017年5月本论文受国家自然科学基金项目资助：温补肾阳法调控AC-cAMP-PKA

3、信号通路治疗抑郁症的作用机制研究（NO：81302900）二○一七年四月2万方数据成都中医药大学2017届硕士研究生学位论文摘要目的观察温补肾阳法对CUMS抑郁模型大鼠AC-cAMP-PKA信号通路的影响，和通过对大鼠大脑组织的光镜下观察，确定大鼠抑郁模型的病理变化及治疗效果，探索其作用机理，为临床使用提供依据。方法选用体重（200±20g）和Open-Field法评分相近的雄性SD大鼠84只，分为两部分，各部分随机分为4组，即空白组，抑郁症模型组，温补肾阳方组、盐酸氟西汀组。采用目前国际最为公认的CUMS法建立大鼠抑郁症模型，共安排21天，每2种刺激不能连续出现

4、。7种不同刺激交替出现2l天后，用Open-Field实验进行评估，判断造模是否成功。采取灌胃给药方式。从实验22天开始，温补肾阳方组、盐酸氟西汀组分别灌胃给予相应药物。空白组、抑郁症模型对照组灌以等量生理盐水。每日1次，连续21天。第一部分共60只大鼠取海马组织，酶联免疫吸附法（Elisa）测定AC、cAMP含量，用蛋白质印迹法（WesternBlot）检测海马组织PKAc蛋白水平。第二部分共24只大鼠取脑组织，经脱水、修剪、包埋、切片、HE染色、封片等程序，最后镜检，分标本照相并硬盘记录数据。结果1.Open-Field实验结果：第一部分针对58只大鼠的Ope

5、n-Field实验结果显示除空白组外，其余各组大鼠经过21天慢性轻度不可预见性应激（CUMS）刺激后，均表现出不同程度抑郁样改变。Open-Field实验中各模型组造模后水平得分、垂直得分显著降低（P<0.01），提示CUMS刺激引起大鼠运动能力和探索能力下降，造模成功。各组大鼠经过21天的灌胃处理后，温补肾阳方组、盐酸氟西汀组大鼠的抑郁行为得到显著改善，Open-Field实验中温补肾阳方组及盐酸氟西汀组大鼠水平得分、垂直得分显著提高，与抑郁模型组相比，具有显著差异（P<0.01）。温补肾阳方组与盐酸氟西汀组相比，两者行为学指标差异无统计学意义（P＞0.05）。

6、表明温补肾阳方能显著改善大鼠的抑郁行为，且其抗抑郁的功效与盐酸氟西汀接近。1万方数据成都中医药大学2017届硕士研究生学位论文第二部分24只大鼠的Open-Field实验结果显示造模结束后（第21天、第42天），模型组、温补肾阳方组、盐酸氯西汀组与空白组相比，水平活动得分和垂直活动得分均明显降低，差别具有显著的统计学意义（P＜0.01）。第21天，各治疗组与模型组比较无统计学差异，第42天，温补肾阳方组与模型组比较，水平活动得分和垂直活动得分均明显上升，差别具有统计学意义（P＜0.05），盐酸氟西汀组与模型组比较，水平活动得分明显上升，差别具有统计学意义（P＜0.

7、05），垂直活动得分差异无统计学意义，各治疗组间比较无统计学意义。给药结束后（第42天）与造模结束后（第21天）比较，空白组、模型组无统计学差异，温补肾阳方组、盐酸氟西汀组水平活动得分及垂直活动得分均有显著的统计学差异（P<0.01）。说明温补肾阳方能有效改善大鼠的抑郁行为，其疗效与盐酸氟西汀组无明显差异。2.Elisa法检测大鼠海马AC、cAMP的结果：与空白组比较，模型大鼠海马中AC含量明显降低（P＜0.01）；与模型组比较，盐酸氟西汀组、温补肾阳方组大鼠海马中AC含量明显增加（P＜0.05，P＜0.05）。与空白组比较，模型大鼠海马中cAMP含量明显降低（P

8、＜0.01