资源描述：
《通过乙肝病毒大表面蛋白诱导的细胞液泡化和细胞凋亡》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、HEPATOLOGY,Vol.36,No.6,2002原文：CellularVacuolizationandApoptosisInducedbyHepatitisBVirusLargeSurfaceProtein作者：Ngee-ChihFoo,ByungY.Ahn,XiaohongMa,WilliamHyun,andT.S.BenedictYen作者单位：SanFranciscoVAMedicalCenter,SanFrancisco,CA;DepartmentofPathologyandCompre
2、hensiveCancerCenter,UniversityofCalifornia,SanFrancisco,CA;andDepartmentofLifeScience,KoreaUniversity,Seoul,Korea.发表刊物：HEPATOLOGY,Vol.36,No.6,2002以下为中文翻译稿：通过乙肝病毒大表面蛋白诱导的细胞液泡化和细胞凋亡纤维淤胆性肝炎(FCH)是乙肝病毒的一种快速发展的过程，它发生于严重的免疫抑制病人中。病理学方面，FCH状态下的肝脏的主要特征是肝细胞产生广泛性的液
3、泡化和细胞凋亡，相比较于普通的乙肝的形成，它很少产生明显的炎症反应。因此，对于FCH，已经被提出，肝细胞的损伤更多的是来自于病毒性的细胞病变效应，而非来自于宿主的免疫反应。作为以上猜想的证明，我们提供了证实，即在培养的肝细胞中转染进选择性表达病毒大的表面蛋白的质粒，从而形成许多大的液泡和产生细胞凋亡。体内的FCH细胞病理情况和体外的这些转染细胞的病变的相似性，表明大的表面蛋白是形成这种急性肝病的直接原因。已发表的关于在FCH下肝细胞中积累大的表面蛋白，这种蛋白是通过病毒而超量表达的，它支持了以上的结论
4、。总之，我们的数据表明在纤维淤胆性肝炎中，大的表面蛋白是导致肝细胞损伤的主要原因。前言：乙肝病毒（HBV）为包膜DNA病毒，它在世界范围内广泛发生[1]。大多数的感染病人能够产生有效的免疫反应并清除病毒。然而，少数个体不能够如此，并且形成了慢性感染。他们会发展为慢性肝炎，肝硬化和肝细胞癌。每年有超过1百万的人死于慢性乙肝感染的并发症。通常我们认为，乙肝相关的肝损伤不是由病毒自身引起，而是通过宿主的免疫反应[2，3]。这种论断由许多发现所支持，这其中包括当在慢性感染个体的百分比例中缺少临床的和病理学上的
5、证据，那些个体仍然在他们的肝细胞中表现出高水平的病毒复制[1]。进一步的，在培养基中生长的肝细胞，转染进乙肝基因组，它可以产生不定数的病毒颗粒，没有证据表明对于它们的复制有细胞病变或者其它负作用[4]。然而，这种病理机制不是对于所的乙肝病例都起作用。在特殊情况中，严重的免疫抑制病人可能死于乙肝感染的情况，如纤维淤胆性肝炎（FCH）。当在FCH情况下，在肝细胞中积累大量的病毒蛋白，伴有广泛的肝细胞液泡化和细胞凋亡，在临床上，产生快速的肝纤维化和肝功能衰竭[5-9]。由于在这些患者中缺少明显的肝炎炎症和免
6、疫抑制，表明了在这些疾病中，一种或多种病毒基因产物和肝细胞的损伤有着一定的联系。乙肝产生的大的表面蛋白有可能是以上现象的起因，因为在转基因小鼠的肝脏中过量表达大的乙肝表面蛋白，表现出慢性的肝炎症状，尽管还没有直接的证据证实对于大的表面蛋白造成的急性细胞病变。在此次研究中，我们提供了实验证据，表明了在培养的肝细胞中表达乙肝的大的表面蛋白会引起细胞凋亡。在死亡之前，来自于粗糙内质网（ER）的小泡，通过膨胀的膜介面的积累，致使细胞表现出明显的细胞质液泡化作用。FCH的肝脏病变，在体外有着相似的反应，和先前的
7、FCHHEPATOLOGY,Vol.36,No.6,2002下肝细胞细胞质中大的病毒表面蛋白的情况积累，表明了大的表面蛋白在此种疾病的病理中有着重要的作用。材料和方法：质粒，pCMVβ（Clontech,PaloAlto,CA）质粒使用的是巨细胞病毒（CMV）即早期启动子来表达半乳糖苷酶。质粒pCMV-EGFP，表达绿色荧光蛋白，它的构建带有CMV启动子，用EcoRI和SmaI消化pCMVβ，再连入用EcoRI和SmaI消化的pEGFP-1（Clontech）。质粒pSFFV-Bcl2和pSFFV-B
8、ax表达Bcl2和Bax。质粒pSV2neo表达新霉素抑制基因，此质粒来自于J.Ou。质粒pCMVLM-S-，表达乙肝大的表面蛋白，由CMV即早期启动子控制，表达的乙肝X蛋白，由其自身启动子控制，如先前的描述[13]。质粒pCMVLM-S-X-和质粒pCMVLM-S-相似，只是它的X基因104密码子进行了突变，由TCA变为TAG。这个突变阻止了任何有功能的X蛋白的产生。细胞培养和DNA转染。HuH-7和NIH3T3细胞用Dulbecco的改进的Eagle
