针刺督脉穴位对癫痫大鼠海马神经细胞核转录因子表达的影响

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1、中图分类号论文编号学科分类号密级？ＳｈａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ硕士学位论文针刺督脉穴位对癫痫大鼠海马神经细胞核转录因子表达的影响ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＮｕｃｌｅａｒＦａｃｔｏｒｅｘｒｅｓｓｉｏｎｉｎＨｉｏｃａｍａｌｎｅｒｖｅｃｅｌｌｓｏｆｐｐｐｐＥｐｉｌｅｐｔｉｃｒａｔｓｔｈｒｏｕｇｈａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎｏｎＧｏｖｅｒｎｏｒＶｅｓｓｅｌ研究生姓名：郝娟娟导师

2、姓名、职称：赵立新教授学科、专业名称：针灸推拿学研究方向：针灸治疗经筋病申请学位类型：科学学位—二〇七年六月一日山西中医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：2017年06月01日关于学位论文使

3、用授权的声明本人完全了解山西中医学院有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权山西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名：论文导师签名：2017年06月01日中文摘要目的探讨针刺督脉穴位（百会、风府、大椎、陶道、无名、身柱）治疗癫痫可能的作用机制。方法采用氯化锂-匹罗卡品法，建造大鼠癫痫模型。将造模成功的

4、大鼠随机分为3组：EP（癫痫）模型组、西药组和针刺组，每组16只。另取大鼠16只作为正常组。造模成功后，当天开始治疗。针刺组选取督脉穴位（百会、风府、大椎、陶道、无名、身柱）进行针刺；西药组选用丙戊酸钠（300mg/kg）进行治疗；正常组、EP模型组不做治疗。治疗疗程为14天，每日1次。治疗结束后，进行Morris水迷宫测试。测试结束后，即刻处死全部大鼠，采用HE染色法观察各组大鼠海马组织的病理变化，运用免疫组化染色法测定各组大鼠海马组织NF-κB(P65)蛋白的表达情况，应用PCR检测各组大鼠

5、海马组织NF-κBmRNA的表达量。结果(1)一般状态及行为学观察四组中，正常组大鼠一般情况最好，且无癫痫发作。EP模型组大鼠一般情况最差，饮食欠佳，体重减轻，毛色枯黄脱落，反应迟钝，常伴有自发性的反复发作癫痫行为。针刺组及西药组大鼠，一般情况较EP模型组有所改善，且自发反复癫痫的发作持续时间和发作频率均低于EP模型组大鼠，差异有统计学意义（P＜0.05）。针刺组及西药组，两组之间差异不大，差异无统计学意义。(P＞0.05)。(2)Morris水迷宫测试结果大鼠平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较，

6、正常组短于EP模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）；针刺组及西药组亦短于EP模型组（P＜0.05），差异有统计学意义。针刺组及西药组组间差异不大，差异无统计学意义(P＞0.05)。(3)HE染色法光镜下的观察结果在光镜下观察海马组织细胞，观察结果显示：正常组大鼠海马组织细胞排列紧密，细胞形态正常；EP模型组大鼠海马组织细胞排列疏松，细胞溶解、变形，染色体边集、固缩、甚至消失；针刺组、西药组大鼠海马组织细胞有不同程度的损伤，但较EP模型组明显改善。(4)免疫组化染色法的鉴定结果正常组大鼠海马组

7、织细胞的细胞浆呈NF-κB(P65)阳性反应，EP模型组大鼠海马I组织细胞的细胞核呈阳性反应，针刺组及西药组细胞浆及细胞核均有阳性表达。统计结果显示，EP模型组大鼠海马NF-κB(P65)的IOD值（平均光密度值）表达高于正常组（P＜0.05），差异有统计学意义。西药组及针刺组IOD值有所下降（P＜0.05），差异有统计学意义。针刺组、西药组之间差异，无统计学意义(P＞0.05)。(5)PCR检测NF-κBmRNA表达量EP模型组大鼠海马组织中NF-κBmRNA较正常组显著提高（P＜0.05），

8、差异有统计学意义；西药组及针刺组表达水平接近,且较EP模型组有所降低（P＜0.05），差异有统计学意义。针刺组、西药组之间差异，无统计学意义(P＞0.05)。结论针刺督脉穴位可以改善EP大鼠的学习记忆能力及一般情况，降低EP大鼠的癫痫发作时间和频率，其作用机制可能与抑制海马组织NF-κBmRNA和蛋白的表达有关。关键词：针刺；癫痫；督脉；NF-κB；PCRIIAbstractObjective：Toexplorethepossiblemechanismofacupunctureinthetrea