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1、2006年第31卷第6期中国油脂87+文章编号:1003-7969(2006)06-0087-03中图分类号:TQ64596文献标识码:A大豆肌醇磷脂制备优化条件的研究吴平,安红,何锡凤,乔成立(齐齐哈尔大学化工学院,161000黑龙省齐齐哈尔市建华区文化大街30号)摘要:利用乙醇-正己烷双溶剂体系对大豆磷脂中肌醇磷脂进行分离。对分离条件进行了优化研究,在乙醇浓度为55%、无水乙酸钠的量为0.05g,正己烷用量为20mL,乙醇用量为30mL,10.0
2、0g大豆混合磷脂中肌醇磷脂的含量可以从26.00%提高到73.89%。并对双溶剂体系的分离度进行测定,在此条件下,分离度可达18.1。关键词:大豆磷脂;肌醇磷脂;分离度;优化磷脂(PL)是细胞膜的组成物质,参与细胞的新1.2.1乙酸钠乙醇溶液的配制称取一定量的无陈代谢。大豆磷脂本身是一种混合物,其主要成分水乙酸钠溶于30mL不同浓度的乙醇中,配制成乙有磷脂酰胆碱(PC),磷脂酰乙醇胺(PE),磷脂酰丝酸钠乙醇溶液。氨酸(PS),以及肌醇磷脂(PI)等。各单组分磷脂1.2.2PI的分离准确称取10
3、.00g大豆混合磷具有各自特殊的功能。富含PC大豆磷脂可以用于脂(PI含量为26.00%)溶于一定量的正己烷中,倒治疗高脂血症和动脉硬化。PI是细胞的信息分子,入分液漏斗中,加入乙酸钠乙醇溶液,在室温下振经磷脂酶C(PLC)水解得到的肌醇三磷脂(IP3)和荡,使其充分接触,静置至溶液分层,分出乙醇相,然1,2-二酰基甘油(DAG)能激发蛋白质激酶C后再加入一定量的乙酸钠乙醇溶液进行二次萃取,[1,2](PKC),引发细胞反应,如收缩、分泌和代谢等。将乙醇萃取液合并。分别除去两相中的溶剂并干研究磷脂类信息化学
4、分子及其过程机理是新兴燥,取干燥后的产品适量溶于适量氯仿中,用HPLC学科,特别是这类分子在机体中存量甚少,而且生物测试其组分。化学稳定性又很差,认识其作用规律极其重要。大[3,4]1.2.3HPLC测定方法色谱柱为30.0cm豆磷脂中PI含量丰富,因此探索PI的分离方法及4.6mm,填料为5m的LichrosorbSi60柱。柱温:制备高纯度的PI有重要意义。利用乙醇和正己烷室温;流动相:A氯仿,B甲醇/水/30%氨水=84/双溶剂体系分离大豆PI,可以提高大豆磷脂中PI的15.5/0.5(V/V
5、/V);梯度淋洗,梯度程序:0~12含量,我们经过试验研究,优化双溶剂体系分离大豆min,溶剂A从95%变化至70%,然后一直到12PI的分离条件。min,保持不变。12~13min,溶剂A从70%变化至1材料与方法95%;流速为1.0mL/min。检测器为蒸发光散射检1.1仪器、试剂5测器。检测器用吹扫气(空气)的压力2.210Pa,Varian高效液相色谱仪,Sedex55型蒸发光散温度为50。射检测器。2结果与讨论大豆混合磷脂(齐齐哈尔三泰精细化工有限责任2.1分离条件的选择公司,粉状);P
6、I标样购自美国Sigma公司;乙醇、正己溶剂分离技术是根据混合磷脂中各组分在溶剂烷、氯仿为分析纯;甲醇为色谱纯;水为二次蒸馏水。中溶解性差异进行分离。利用乙醇-正己烷体系可1.2操作步骤以得到高PI含量的大豆磷脂。分离过程中影响因素主要有乙醇浓度、溶剂比(V乙醇V正己烷)、乙醇中可收稿日期:2006-03-09;修回日期:2006-04-11[5,6][7]溶性盐的含量等。陈志强等人对乙醇浓度对基金项目:黑龙江省教育厅骨干教师创新能力资助计划项目(项目号:1054G065)分离结果的影响进行了研究,
7、并建立大豆磷脂在乙作者简介:吴平(1971-),男,助理研究员;主要从事醇和正己烷体系分离度的概念。大豆磷脂分离及工业化的研究工作。用乙醇为溶剂进行萃取,PI和PE在乙醇和正88中国油脂2006年第31卷第6期己烷中的分配系数分别为:表2溶剂比对分离效果的影响[PI]乙醇W乙醇(PI%)乙醇/V乙醇己烷相中PI乙醇相中PI=V己烷V乙醇分离度[PI]己烷W己烷(PI%)己烷/V己烷含量(%)含量(%)1133.8060.043.78[PE]乙醇W乙醇(PE%)乙
8、醇/V乙醇=11.530.6368.506.60[PE]己烷W己烷(PE%)己烷/V己烷1231.6159.053.89PI与PE的分离度即PI与PE在两相中的分配1329.4152.721.96系数比(即溶剂的选择性)。1427.5748.292.041527.0146.551.99[PI]乙醇/[PI]己烷PI与PE的分离度=[PE]乙醇/[PE]己烷由表2可以看出,溶剂比对PI含量变化影响不
