课题1微生物的实验室培养1

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1、专题2微生物的培养和应用病毒原核微生物真核微生物微生物类群基本知识细菌蓝藻放线菌支原体立克次氏体衣原体酵母菌霉菌蕈菌（蘑菇）病毒几乎可以感染所有的细胞生物，并具有宿主特异性噬菌体（phage）植物病毒（plantviruses）动物病毒（animalviruses）微生物类群基本知识微生物类群基本知识病毒培养动物接种鸡胚接种（常用的病毒培养法之一）组织培养（应用最广的方法）常见的三种细菌典型形态A.球菌B.杆菌C.弧菌芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适

2、宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.芽孢：椭圆形的休眠体二、培养基人们按着微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。1、概念2、培养基的营养构成及所需其它条件1）、一般都含有水、碳源、氮源、和无机盐。2）、还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．3、培养基配置原则目的明确营养协调理化条件适宜经济节约根据不同的微生物的营养要求配制针对性强的培养基。培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累如：pH标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多微

3、生物的分离、计数等半固体培养基加入琼脂较少观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成合成培养基由已知成分配制而成，培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明确工业生产目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物选择培养基添加（或缺少）某种化学物质培养、分离出特定的微生物4、培养基的分类标准鉴别培养基在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，可以鉴别不同种类的微生物如：在培养基中加入伊红和美蓝，可以鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌：若有大

4、肠杆菌，其代谢产物（有机酸）就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽选择培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入四环素、卡那霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞可抑制细菌、放线菌细胞壁主要成分肽聚糖的合成其细胞壁是由纤维素、几丁质、葡聚糖组成【例】以下是单克隆抗体制备流程示意图：根据培养基的________分类，图中HAT培养基属于________培养基选择用途菌落:单个或少数细

5、菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。（二）无菌技术1.无菌技术的概念：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。消毒定义：2.消毒与灭菌的概念及两者的区别灭菌定义：是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽胞、孢子）。是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽胞和孢子。[思维激活]用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌？70%与95%的酒精，哪一种效果更好？为什么？提示酒精擦拭属化学消毒，酒精消毒时

6、，70%的酒精杀菌效果最好。原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。消毒和灭菌的区别条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌消毒的方法：1、煮沸消毒法：100℃煮沸5～6min2、巴氏消毒法：70～75℃下煮30min或80℃下煮15min3、用体积分数为50%～70%酒精

7、溶液等进行皮肤消毒4、氯气消毒水源5、紫外线消毒灭菌的方法：1、灼烧灭菌2、干热灭菌：160～170℃下加热1～2h3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15～30min3.常用的消毒与灭菌的方法：是指用紫外线（能量）照射杀灭微生物的方法，紫外线不仅能使核酸、蛋白质变性，而且能使空气中氧气产生微量臭氧，从而达到共同杀菌作用。1、灼烧灭菌：灭菌的方法：2、干热灭菌：160～170℃下加热1～2h。3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃条件下维持15～30min。答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（1）、（

8、2）需要灭菌；（3）需要消毒。1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实